Mikroskopisk analyse af sputum

Mikroskopisk observation af native og faste farvede sputumprøver tillader en detaljeret undersøgelse af dens cellulære struktur, og en vis grad afspejler arten af den patologiske proces i lunger og bronkier, dens aktivitet, at identificere de forskellige fibrøse og krystallinsk dannelse, har også vigtig diagnostisk værdi, og endelig groft vurdere tilstanden mikrobiell flora i luftvejene (bakterioskopi).

Ved en mikroskopi brug indfødte og malede præparater af en sputum. For at studere den mikrobielle flora (bakterioskopi) bliver sputum-smuds normalt farvet af Romanovsky-Giemsa ifølge Gram og til påvisning af Mycobacterium tuberculosis, men Cilu-Nielsen.

Cellulære elementer og elastiske fibre

Af de cellulære elementer, der kan påvises i sputum hos patienter med lungebetændelse, er epitelceller, alveolære makrofager, leukocytter og erytrocytter af diagnostisk betydning.

Epitelceller. Pladeepitel har ikke fra munden, næsesvælget vokal folder og strubelåget diagnostiske værdi, selv om påvisning af et stort antal pladeceller, typisk indikerer en lav kvalitet sputumprøve leveres til laboratoriet og spyt indeholdende væsentlig urenhed.

Hos patienter med lungebetændelse anses sputum for at blive undersøgt, hvis antallet af epithelceller med en mikroskopi med en lille stigning ikke overstiger 10 i synsfeltet. Et større antal epithelceller indikerer en uacceptabel overvejelse af oropharyngeal indhold i den biologiske prøve.

Alveolære makrofager, som i små mængder også kan findes i noget sputum, er store celler af reticulohystocytisk oprindelse med en ekscentrisk lokaliseret stor kerne og rigelige indeslutninger i cytoplasmaet. Disse indeslutninger kan bestå af makrofagabsorberede små støvpartikler (støvceller), leukocytter og lignende. Antallet af alveolære makrofager stiger med inflammatoriske processer i lungeparenchyma og luftveje, herunder lungebetændelse.

Celler af cylindrisk cilieret epithelium, der beklæder slimhinden i strubehovedet, luftrøret og bronkierne. De ser ud som aflange celler, udvidet i den ene ende, hvor kernen og cilia er placeret. Celler cylindrisk cilierede epitel findes i enhver spyt, men deres stigning indikerer skade bronkialslimhinden og luftrør (akut og kronisk bronkitis, bronkiektasi, tracheitis, halsbetændelse).

Leukocytter i små mængder (2-5 i synsfeltet) findes i noget sputum. Når betændelse i lungevæv eller bronkialslimhinde og luftrør, især når suppuration (gangren, lungeabscess, bronchiectasis), øges deres antal signifikant.

Ved farvning af sputumpræparater ifølge Romanovsky-Giemsa er det muligt at differentiere individuelle leukocytter, som undertiden har en vigtig diagnostisk værdi. Således, når de udtrykkes lungeinflammation eller bronkiale slimhinde væv stiger, når det samlede antal neutrofiler og antallet af degenerative former for fragmentering af kerner, og ødelæggelsen af cytoplasmaet.

En stigning i antallet af degenerative former af leukocytter er det vigtigste tegn på aktiviteten af den inflammatoriske proces og sygdommens mere alvorlige forløb.

Erythrocytter. Enkelte erythrocytter kan detekteres praktisk taget og enhver sputum. En signifikant stigning observeres, når vaskulær permeabilitet er nedsat hos patienter med lungebetændelse, med ødelæggelse af lunge- eller bronkialvæv, stagnation i en lille kredsløb, lungeinfarkt osv. I et stort antal røde blodlegemer i sputum findes under hemoptysis af enhver genese.

Elastiske fibre. Et andet element af sputum-plastfibre, der forekommer i sputum, når ødelæggelse af lungevæv (lungabces, tuberkulose, desintegrerende lungekræft osv.) Bør også nævnes. Elastiske fibre præsenteres i sputum i form af tynde to-kontur, krympede filamenter med dikotom division i enderne. Udseendet af elastiske fibre i sputum hos patienter med svær lungebetændelse indikerer forekomsten af en af komplikationerne af sygdommen - abscessering af lungevæv. I nogle tilfælde kan elastiske fibre i sputum ved dannelsen af lungeabsys detekteres selv lidt tidligere end de tilsvarende radiografiske ændringer.

Ofte kan der med tynde fibrinfibre med kronisk lungebetændelse, tuberkulose, actinomycosis, fibrinøs bronkitis i sputumpræparater detekteres.

Tegn på en aktiv inflammatorisk proces i lungerne er:

1. Sputumets art (slimhinde eller purulent)
2. en stigning i antallet af neutrofiler i sputum, herunder deres degenerative former;
3. en stigning i antallet af alveolære makrofager (fra enkeltklynger af flere celler i synsfeltet og mere);

Udseendet i sputum af elastiske fibre indikerer ødelæggelsen af lungevæv og dannelsen af lungeabscess.

De endelige konklusioner om tilstedeværelse og grad af aktivitet af inflammation og destruktion af lungevæv formes kun, når de sammenlignes med det kliniske billede af sygdommen og resultaterne af andre laboratorie- og instrumentelle undersøgelsesmetoder.

[1], [2], [3], [4], [5]

Mikrobiel flora

Smørmikroskopi, farvet i overensstemmelse med Gram, og undersøgelsen af mikrobiell flora (bakterioskopi) hos en del af patienter med lungebetændelse tillader foreløbigt at etablere det mest sandsynlige årsagsmiddel til lunginfektion. Denne enkle metode til ekspresdiagnostik af patogenet er ikke tilstrækkelig nok og bør kun anvendes i kombination med andre (mikrobiologiske, immunologiske) metoder til sputumundersøgelse. Immersionsmikroskopi af farvede udstrålinger er undertiden meget nyttig til nødvalg og administration af passende antibiotikabehandling. Man bør dog huske på muligheden for forurening af det bronchiale indhold af mikrofloraen i det øvre luftveje og mundhulen, især når sputumindsamling er ukorrekt.

Sputum anses derfor for egnet til yderligere undersøgelse (bakterioskopi og mikrobiologisk undersøgelse), hvis den opfylder følgende betingelser:

• Gramfarvning i sputum afslører et stort antal neutrofiler (mere end 25 i synsfeltet med en lille forstørrelse af mikroskopet);
• Antallet af epithelceller, der er mere karakteristiske for indholdet af oropharynx, overstiger ikke 10;
• i præparatet er der en overvejelse af mikroorganismer af samme morfologiske type.

På Gram-farvning af spyt i en smøre undertiden være god nok til at identificere gram pneumokokker, streptokokker, stafylokokker og gram-negative bakterier gruppe -. Klebsiellu, wand Pfeiffer, E. Coli og andre grampositive bakterier I dette tilfælde bliver blå, og Gram - rød.

Bakterielle patogener af lungebetændelse

Grampositiv	Gram
Pneumococcus Streptococcus pneumoniae. Streptokokki Streptococcus pyogenes, Streptococcus viridans. Staffan okokki: Staphylococcus aureus, Staphylococcus haemolyticus.	Beklædning  (Klebsiella pneumoniae) Hemophilus influenzae (Pfeiffer) Haemophilius influenzae Pseudomonas aeruginosa  (Pseudomonas aeruginosa) Legionella (Legionella Pneumophilia) E. Coli (Escherichia coli)

Pre sputum smøre er den nemmeste måde at lungebetændelse patogen verifikation og har en bestemt værdi for udvælgelsen af den optimale antibiotikabehandling. For eksempel, når påvisning udstrygninger farvet med Gram, grompolozhitelnyh diplococci (pneumokokker) eller stafylokokker stedet for bredspektrede antibiotika, der øger risikoen for selektion og opformering af mikroorganismer aitibiotikorezistentnyh muligt at tildele den målrettet terapi, aktive mod stafylokokker eller pneumokokker. I andre tilfælde kan påvisning af de dominerende flora i Gram smears indikerer pas, der forårsager lungebetændelse Enterobacteriaceae er gram-negative (Klebsiella, E. Coli, etc.), hvilket kræver en tilsvarende destination målrettet terapi.

Imidlertid kan den foreløbige afslutning af den sandsynlige agens af lungeinfektion ved mikroskopi kun gøres baserede pas signifikant stigning af bakterier i spyt, i en koncentration på 10 ⁶ - 10 ⁷  mikrobielle celler / ml eller mere (LL Vishnjakova). Lav koncentration af mikroorganismer (<10 ³  m.ks / ml) er karakteristiske for den ledsagende mikroflora. Hvis koncentrationen af mikrobielle celler i området fra 10 ⁴  til 10 ⁶  mikrobielle celler / ml, betyder det ikke udelukker det ætiologiske rolle af denne mikroorganisme i forekomsten af lungeinfektion, men beviser ikke det.

Det skal også huskes, at "atypiske" intracellulære patogener (mycoplasma,  legionella, chlamydia, rickettsia) ikke pletter Gramm. I disse tilfælde kan mistanken om at have en "atypisk" infektion forekomme, hvis smør viser en dissociation mellem et stort antal neutrofiler og et ekstremt lille antal mikrobielle celler.

Desværre, hvilken fremgangsmåde er kendetegnet ved mikroskopi og generelt temmelig lav følsomhed og specificitet. Ikke prædiktiv værdi selv mod pneumokokker er godt gjort når knap 50%. Det betyder, at halvdelen af metode giver falske positive resultater. Dette skyldes flere årsager, hvoraf den ene er den kendsgerning, at omkring 1/3 af patienterne før indlæggelse har fået antibiotika, hvilket i høj grad reducerer effektiviteten af spyt smøre. Selv i tilfælde af positive resultater af undersøgelsen, hvilket indikerer en tilstrækkelig høj koncentration i smear "typiske" bakterielle patogener (fx pneumokok), kan ikke fuldstændigt udelukke tilstedeværelsen af co-infektion "atypiske" intracellulære patogener (mycoplasma, Chlamydia, Legionella).

Metoden til bakterioskopi af sputum-udstrygninger, farvet af Gram, hjælper i nogle tilfælde med at verificere det forårsaget af lungebetændelse, selvom det generelt har meget lav prædiktiv værdi. Atypiske intracellulære patogener (mycoplasma, legionella, chlamydia, rickettsia) kontrolleres slet ikke ved metoden for bakterioskopi, da de ikke pletterer Gramm.

Det bør nævnes muligheden for mikroskopisk diagnose hos patienter med lungebetændelse af svampeinfektion. Det mest relevante for patienter, der får langvarig behandling med bredspektret antibiotika, er påvisning af Candida albicans sputum i form af gærlignende celler og forgrenet mycelium ved mikroskopi af native eller farvede sputumpræparater. De indikerer en ændring i mikrofloraen af det trakeobronchiale indhold, som forekommer under påvirkning af antibiotikabehandling, hvilket kræver en væsentlig korrektion af terapien.

I nogle tilfælde hos patienter med lungebetændelse er der behov for at differentiere den eksisterende lungesygdom med tuberkulose. Til dette formål bruge en farve smear Ziehl-Nielsen, som i visse tilfælde tillader identifikation af Mycobacterium tuberculosis, men et negativt resultat på en sådan undersøgelse betyder ikke mangel på TB-patienter. Ved farvning af sputum ifølge Tsil-Nielsen er mycobacterium tuberculosis farvet rødt, og alle andre sputumelementer er blå. Tuberkuløse mykobakterier udviser fæces, lige eller svagt buede stokke af forskellig længde med separate fortykkelser. De er placeret i forberedelsen i grupper eller enkeltvis. Diagnostisk værdi er detektionen ved udarbejdelsen af ensartet enkelt mykobakterie tuberkulose.

For at øge effektiviteten af mikroskopisk påvisning af mykobakterier tuberkulose brug en række yderligere metoder. Den mest almindelige af disse er den såkaldte flotationsmetode, hvor homogeniseret sputum ryster med toluen, xylen eller benzin, hvis dråber dukker op og fanger mykobakterier. Efter aflejring af sputumet pipetteres det øverste lag på glideren. Derefter fastlægges stoffet og farves af Tsilyu-Nielsen. Der er andre metoder til akkumulering (elektroforese) og mikroskopi af tuberkulosebakterier (luminescensmikroskopi).

Mikroskopisk undersøgelse (analyse) af sputum kan detektere slim, cellulære elementer, fibrøse og krystallinske formationer, svampe, bakterier og parasitter.

celler

• Alveolære makrofager er celler med reticulogistocyt oprindelse. Et stort antal makrofager i sputum detekteres i kroniske processer og på tidspunktet for løsning af akutte processer i det bronchopulmonale system. Alveolære makrofager indeholdende hæmosiderin ("celler med hjertefejl") påvises med et mildt infarkt, blødning, stagnation i en lille cirkel af blodcirkulation. Makrofager med lipiddråber er et tegn på obstruktiv proces i bronchi og bronchioler.
• Xantomceller (fede makrofager) findes i abscess, actinomycosis, echinococcosis af lungerne.
• Celler af det cylindriske cilierede epithelium er celler af slimhinden i strubehovedet, luftrøret og bronchi; de findes i bronkitis, tracheitis, bronchial astma, maligne neoplasmer i lungerne.
• Det flade epitel er detekteret, når spyt kommer ind i sputumet, det har ingen diagnostisk betydning.
• Leukocytter i en eller anden mængde er til stede i enhver sputum. Et stort antal neutrofiler detekteres i mucopurulent og purulent sputum. Eosinofiler er rige på sputum i bronchial astma, eosinofil lungebetændelse, glottis lungelæsioner og lungeinfarkt. Eosinofiler kan forekomme i sputum for tuberkulose og lungekræft. Lymfocytter i stort antal findes i kighoste og i sjældnere tilfælde med tuberkulose.
• Erythrocytter. Detektion af enkeltrøde blodlegemer i sputum er ikke af diagnostisk betydning. Hvis der er frisk blod til stede i sputumet, bestemmes uændrede erytrocytter, men hvis det blod, der har været i luftvejene i lang tid, forlader med sputum, findes der udvaskede røde blodlegemer.
• Celler af maligne tumorer findes i maligne neoplasmer.

fibre

• Elastiske fibre forekommer i forfaldet af lungevæv, som ledsages af ødelæggelsen af epithelaget og frigivelsen af elastiske fibre; de findes i tuberkulose, abscess, echinokokose, neoplasmer i lungerne.
• Koronale fibre detekteres i kroniske lungesygdomme, som f.eks. Cavernøs tuberkulose.
• Beregnet elastiske fibre er elastiske fibre imprægneret med calciumsalte. Påvisning af dem i sputum er karakteristisk for nedbrydning af tuberkulær petrichitis.

Spiraler, krystaller

• Kurshman spiraler er dannet i bronkiets spastiske tilstand og tilstedeværelsen af slim i dem. Under et hostestryk frigøres viskøs slim i lumen af en større bronchus, der drejer i en spiral. Kurshman spiraler forekommer med bronchial astma, bronkitis, lungetumorer, komprimering af bronchi.
• Charcot-Leiden-krystallerne er produkterne fra nedbrydning af eosinofiler. Vises sædvanligvis i et sputum indeholdende eosinofiler; er karakteristiske for bronchial astma, allergiske tilstande, eosinofile infiltrater i lungerne, lungeflugter.
• Kolesterolkrystaller fremkommer med abscess, lunge echinococcosis, neoplasmer i lungerne.
• Krystaller af hæmatoidin er karakteristiske for lungens bryst og gangren.
• Druser af actinomycete påvises i lungernes actinomycose.
• Echinococcuselementer forekommer med lungernes echinokokker.
• Corks Dietrich - klumper af en gullig-grå farve, der har en ubehagelig lugt. De består af detritus, bakterier, fedtsyrer, fedtdråber. De er typiske for en abscess af lunge og bronchiectasis.
• Ehrlichs tetrad består af fire elementer: forkalket detritus, forkalkede elastiske fibre, kolesterolkrystaller og mycobacterium tuberkulose. Vises i forfaldet af det forkalkede primære tuberkulære fokus.

Mycelium og spirende svampeceller forekommer i svampelæsioner i det bronchopulmonale system.

Pneumocystis forekommer med pneumocystis lungebetændelse.

Spiruler af svampe detekteres i lungernes coccidioidomycose.

Ascaridlarverne detekteres med ascariasis.

Larver i tarmens ugristic identificeres med strongyloidiasis.

Æggene i lungerne er identificeret med paragonimose.

Elementer fundet i sputum i bronchial astma. Når bronchial astma sædvanligvis adskilles af en lille mængde slimhinde, viskøs sputum. Makroskopisk kan du se Kurshman-spiralen. Når mikroskopisk forskning er karakteristisk for tilstedeværelsen af eosinofiler, cylindrisk epitel, er der krystaller af Charcot-Leiden.