Medicinsk ekspert af artiklen
Nye publikationer
Southern blotting
Sidst revideret: 05.07.2025
Alt iLive-indhold gennemgås medie eller kontrolleres for at sikre så meget faktuel nøjagtighed som muligt.
Vi har strenge sourcing retningslinjer og kun link til velrenommerede medie websteder, akademiske forskningsinstitutioner og, når det er muligt, medicinsk peer reviewed undersøgelser. Bemærk at tallene inden for parentes ([1], [2] osv.) Er klikbare links til disse undersøgelser.
Hvis du mener, at noget af vores indhold er unøjagtigt, forældet eller på anden måde tvivlsomt, skal du vælge det og trykke på Ctrl + Enter.
Southern blotting (udviklet af E. Southern og R. Davis i 1975) er den primære metode, der i øjeblikket anvendes til at identificere gener for en bestemt sygdom. For at gøre dette ekstraheres DNA fra patientens celler og behandles med en eller flere restriktionsendonukleaser. De resulterende fragmenter underkastes elektroforese, hvilket gør det muligt at separere dem efter størrelse (mindre fragmenter bevæger sig hurtigere gennem gelens porer). Fragmenterne overføres (genoptrykkes) derefter til et nitrocellulosefilter, hvorpå en radioaktivt mærket probe er lagdelt. Proben binder kun til den komplementære sekvens. Derefter bestemmes positionen af det ønskede fragment af genomisk DNA på elektroferogrammet ved hjælp af autoradiografi.
Hybridisering med en mærket DNA-probe af DNA- eller RNA-præparater påført dråbevis på en fast matrix uden forudgående restriktion og elektroforese kaldes punkt- eller spaltehybridisering, afhængigt af konfigurationen af DNA-pletten på filteret (henholdsvis rund eller aflang).
[