Medicinsk ekspert af artiklen
Nye publikationer
Sauzern-blotting
Sidst revideret: 23.04.2024
Alt iLive-indhold gennemgås medie eller kontrolleres for at sikre så meget faktuel nøjagtighed som muligt.
Vi har strenge sourcing retningslinjer og kun link til velrenommerede medie websteder, akademiske forskningsinstitutioner og, når det er muligt, medicinsk peer reviewed undersøgelser. Bemærk at tallene inden for parentes ([1], [2] osv.) Er klikbare links til disse undersøgelser.
Hvis du mener, at noget af vores indhold er unøjagtigt, forældet eller på anden måde tvivlsomt, skal du vælge det og trykke på Ctrl + Enter.
Southern blotting (udviklet af E. Southern og R. Davies i 1975) er den vigtigste metode ved hvilken gener af en bestemt sygdom bliver identificeret. Til dette ekstraheres DNA fra patientens celler og forarbejdes med en af restriktionsendonucleaserne (eller flere). De resulterende fragmenter udsættes for elektroforese, som tillader dem at blive dimensioneret i størrelse (mindre fragmenter bevæger sig hurtigere gennem gelens porer). Derefter overføres fragmenterne (genudtrykt) til et nitrocellulosefilter, på hvilket den radioaktive mærke sonde er lagdelt. Sonden binder kun til den komplementære sekvens. Derefter bestemmes ved hjælp af autoradiografimetoden det ønskede fragment af genomisk DNA på elektroforegrammet.
Hybridisering med de mærkede DNA-probe RNA- eller DNA-præparater, drop påført den faste matrix uden forudgående begrænsning og elektroforese kaldes Dot og slot-hybridisering afhængigt af konfigurationen af DNA pletter på filtret (runde eller aflange, henholdsvis).
[