Hepatitis C PCR

HCV er normalt fraværende i materialet.

I modsætning til serologiske metoder til diagnosticering af viral hepatitis C, som detekterer antistoffer mod HCV, tillader PCR direkte at detektere tilstedeværelsen af HCV-RNA og kvantificere dets koncentration i testmaterialet. Testen har artsspecificitet og høj følsomhed: ti HCV-RNA-molekyler i testmaterialet er nok til at detektere det. Detektering af antistoffer mod HCV bekræfter kun patientens infektion, men tillader ikke at bedømme aktiviteten af den infektiøse proces (replikation af virusset) og sygdommens prognose. Derudover detekteres antistoffer mod HCV både i blodet hos patienter med akut og kronisk hepatitis og hos de patienter, der var syge og raske, og ofte optræder antistoffer i blodet først flere måneder efter sygdommens kliniske billede, hvilket komplicerer diagnosen. Detektering af HCV i blodet ved hjælp af PCR er en mere informativ diagnostisk metode. Detektering af HCV-RNA i PCR indikerer viræmi, giver mulighed for at bedømme virussets replikation i kroppen og fungerer som et af kriterierne for effektiviteten af antiviral behandling. Påvisning af HCV-RNA ved PCR i tidlige stadier af virusinfektion i fuldstændig fravær af serologiske markører kan tjene som det tidligste tegn på infektion. Isoleret påvisning af HCV-RNA i fuldstændig fravær af andre serologiske markører kan dog ikke fuldstændigt udelukke et falsk positivt PCR-resultat. I sådanne tilfælde er en omfattende vurdering af kliniske, biokemiske og morfologiske undersøgelser med gentagen bekræftelse af tilstedeværelsen af infektion ved PCR nødvendig.

Brugen af PCR-metoden hos patienter med kronisk viral hepatitis C er af stor betydning, da de fleste af dem mangler en korrelation mellem tilstedeværelsen af virusreplikation og aktiviteten af leverenzymer. I sådanne tilfælde er det kun PCR, der giver os mulighed for at bedømme tilstedeværelsen af virusreplikation, især hvis det endelige resultat udtrykkes kvantitativt. I de fleste tilfælde af sygdommen forekommer forsvinden af HCV-RNA fra blodserumet senere end normaliseringen af leverenzymer, så deres normalisering kan ikke tjene som grundlag for at stoppe antiviral behandling.

Det er praktisk vigtigt at undersøge ikke kun blodserum, men også lymfocytter og hepatobiopsiprøver ved hjælp af PCR-metoden for at detektere HCV-RNA. Virus kan detekteres 2-3 gange oftere i levervæv end i blodserum. Ved evaluering af resultaterne af en blodserumtest for HCV-RNA skal det huskes, at viræmi kan være af fluktuerende natur (såvel som ændringer i enzymaktivitet). Derfor kan der efter positive PCR-testresultater opnås et negativt resultat og omvendt. I sådanne tilfælde er det bedre at undersøge hepatobiopsiprøverne for at afklare eventuelle tvivlsspørgsmål.

Påvisning af HCV-RNA i materiale ved hjælp af PCR anvendes til følgende formål:

• løsning af tvivlsomme serologiske testresultater;
• differentiering af viral hepatitis C fra andre former for hepatitis;
• identifikation af sygdommens akutte stadium i sammenligning med den tidligere infektion eller kontakt; bestemmelse af infektionsstadiet hos nyfødte fra HCV-seropositive mødre;
• overvågning af effektiviteten af antiviral behandling.

Patienter med mistanke om viral hepatitis C:

• donorer;
• personer med risikofaktorer;
• personer med forhøjet ALAT-aktivitet;
• patienter med akut hepatitis

Alle de ovennævnte funktioner ved evaluering af resultater og tilgange til diagnosticering af HCV ved hjælp af PCR gælder også for andre infektioner.

PCR-metoden gør det ikke blot muligt at detektere HCV-RNA i det undersøgte materiale, men også at fastslå dets genotype. Bestemmelse af virusgenotypen er af stor betydning for udvælgelsen af patienter med kronisk viral hepatitis C til behandling med interferon-alfa og ribavirin. Laboratorieindikationer for behandling af kronisk viral hepatitis C med interferon-alfa er som følger:

• øget transaminaseaktivitet;
• tilstedeværelsen af HCV-RNA i blodet;
• HCV genotype 1;
• høj viræmi i blodet (mere end 8×105 ^kopier /ml).

I øjeblikket er det muligt kvantitativt at bestemme HCV RNA-indholdet i blodserum ved hjælp af PCR-metoden, hvilket er af stor betydning for overvågning af interferon alfa-behandling. Niveauet af viræmi vurderes som følger: ved HCV RNA-indhold fra 102 ^til 104 ^kopier /ml - svagt; fra 105 ^til 107 ^kopier /ml - gennemsnitligt, over ¹⁰⁸ kopier/ml - højt. Ved effektiv behandling falder niveauet af viræmi.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]