Mikrobiologisk undersøgelse af sputum

Mikrobiologisk undersøgelse er det vigtigste led i den diagnostiske søgning og verifikation af det forårsagende agens til lungebetændelse. Det involverer ikke blot isolering af det forårsagende agens, men også undersøgelse af dets egenskaber, herunder følsomhed over for forskellige lægemidler med bakteriedræbende og bakteriostatisk virkning.

Til dette formål anvendes metoden med sputumsåning på forskellige næringsmedier. I en sputumprøve, der leveres til laboratoriet, udvælges purulente klumper og vaskes omhyggeligt i en petriskål med en isotopisk opløsning af natriumchlorid, som til en vis grad gør det muligt for dem at blive befriet fra mikrofloraen i de øvre luftveje. Såningen af purulente sputumklumper udføres på forskellige næringsmedier, hvis sammensætning er beskrevet i særlige manualer om mikrobiologi. Medierne med såningen inkuberes ved 37,5 °C i 24 timer. Rene kulturer isoleres fra de dyrkede kolonier, de identificeres ved hjælp af kendte mikrobiologiske metoder, og deres følsomhed over for antibiotika bestemmes.

For at bestemme det kvantitative indhold af mikroorganismer homogeniseres sputumet, blandes med næringsbouillon, og der fremstilles successive tifoldige fortyndinger af blandingen, som inokuleres på petriskåle med blodagar. Efter 24 timers inkubation ved 37,5°C tages resultaterne i betragtning, idet kolonier af samme type i udseende tælles, og materialets fortyndingsgrad tages i betragtning. Udstrygningsprøver fremstilles fra kolonierne og undersøges under et mikroskop.

Fortolkning af resultater

Fortolkning af resultaterne af mikrobiologisk undersøgelse af sputum er ret kompleks, hvilket forklares af en række faktorer. Det er allerede nævnt ovenfor om den konstante tilførsel af bronkialindhold til mikrofloraen i de øvre luftveje og mundhulen og den hyppige tilstedeværelse i det normale trakeobronkiale indhold hos raske mennesker af de fleste af de mest typiske årsager til luftvejssygdomme (pneumokokker, streptokokker, stafylokokker osv.). I denne henseende gør isoleringen i sputum under mikrobiologiske undersøgelser af en forbindelse af forskellige mikroorganismer, hvoraf de fleste i dette specifikke tilfælde er opportunistiske, det ekstremt vanskeligt at fastslå sygdommens årsag. For at fortolke resultaterne af mikrobiologisk undersøgelse af sputum er det derfor nødvendigt at tage hensyn til den kvantitative overvægt af en bestemt type bakterier (mere end 10 ⁶ -10 ⁷ mc/ml), forekomsten af visse mikroorganismer i eksacerbationsfasen og deres forsvinden i remissionsperioden. Det er meget vigtigt at tage hensyn til sygdommens kliniske billede.

De vigtigste og mulige årsagssammenhænge til forskellige kliniske former for lungebetændelse

Klinisk form for lungebetændelse	Vigtigste patogener	Mulige patogener
Kropøs	Pneumokokker	Streptokokker, Klebsiella
Efter influenza	Stafylokokker, pneumokokker, klebsiella	Haemophilus influenzae, streptokokker
Abscessing	Stafylokokker, bakteroider, blandet flora	Klebsiella, Pseudomonas aeruginosa
Aspiration	Bacteroides, anaerobe streptokokker	Stafylokokker, pneumokokker
Postoperativ	Stafylokokker	Pneumokokker, Klebsiella
Mellemliggende	Mykoplasmer	Patogener af ornitose, psittacosis
Sekundær lungebetændelse hos hospitalspatienter uden tidligere antibakteriel behandling	Stafylokokker, pneumokokker, klebsiella, bakteroider	Escherichia coli, serratia osv.
Sekundær lungebetændelse udviklet på baggrund af antibakteriel behandling	Fakultative patogene mikroorganismer	Pseudomonas, Serratia, Klebsiella, Staphylococcus, Proteus osv.
Hos patienter med kronisk bronkitis	Pneumokokker, Haemophilus influenzae	Stafylokokker, streptokokker
Hos patienter med alkoholisme	Pneumokokker, Haemophilus influenzae, Klebsiella	E. coli, protozoer
Ved erhvervet immundefektsyndrom	Pneumocystis, svampe	Cytomegalovirusser
Hos patienter, hvis pleje varetages af udenforstående	Pneumokokker, stafylokokker, hæmofile papiller	Klebsiella, Escherichia coli

Ved kvantitativ vurdering af resultaterne af undersøgelsen af mikrobiel kontaminering hos patienter med lungebetændelse er det nødvendigt at huske på denne indikators ekstremt høje følsomhed over for ordination af antibiotika. Selv kortvarig behandling med antibakterielle lægemidler kan føre til et kraftigt fald i mikrobiel kontaminering, hvilket ikke tillader en tilstrækkelig vurdering af resultaterne af sputumundersøgelsen. Derfor er det tilrådeligt at indsamle sputum, før antibiotikabehandling ordineres.

Det skal også bemærkes, at der anvendes specielle selektive næringsmedier til at dyrke intracellulære patogener af lungebetændelse (mycoplasma, legionella, klamydia, rickettsia). Rutinemæssig mikrobiologisk testning ved hjælp af konventionelle næringsmedier (agar-agar) giver aldrig positive resultater. Derfor bør valget af specifikke metoder til mikrobiologisk testning udføres med deltagelse af den behandlende læge, som er forpligtet til at informere laboratorielægen om sine mistanker om den mulige rolle, som intracellulære patogener spiller i forekomsten af lungebetændelse hos denne patient.

Det skal tilføjes, at selv en teknisk perfekt mikrobiologisk undersøgelse af sputum i reel klinisk praksis tillader identifikation af patogenet i højst 40-60% af tilfældene. Derfor kan andre moderne forskningsmetoder anvendes til at verificere patogenet. Informationsindholdet i en bakteriologisk undersøgelse kan øges betydeligt ved at anvende trakeobronkial aspirat, væske opnået under bronkoalveolær lavage (BAL), bronkoskopi osv., i stedet for sputum, som det biologiske materiale, der undersøges.

Derudover kan metoden med immunofluorescens af forskellige biologiske materialer (bronkoskopimateriale, blod, pleuraindhold osv.), PCR-diagnostiske metoder og undersøgelse af niveauet af specifikke antistoffer i blodserum anvendes til at identificere lungebetændelsespatogener. Desværre har disse diagnostiske metoder endnu ikke fundet bred klinisk anvendelse og anvendes i øjeblikket kun i store specialiserede centre og laboratorier.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]