PCR af hepatitis C

HCV i materialet er normalt fraværende.

I modsætning til serologiske metoder til diagnosticering af viral hepatitis C, hvor der opdages antistoffer mod HCV, kan PCR registrere nærvær af HCV RNA direkte og kvantificere dets koncentration i testmaterialet. Testen har specifik specificitet og høj følsomhed: ti HCV RNA molekyler i testmaterialet er tilstrækkelige til dets påvisning. Påvisningen af antistoffer mod HCV bekræfter kun faktumet af infektion hos patienten, men tillader ikke at bedømme aktiviteten af den infektiøse proces (omkring replikation af viruset) og prognosen af sygdommen. Hertil kommer, at antistoffer mod HCV påvist i blodet hos patienter med akut og kronisk hepatitis, samt i de patienter, der er syge og nyttiggøres, men ofte antistoffer forekommer i blodet kun et par måneder efter debut af klinisk sygdom, hvilket gør det vanskeligt at diagnosticere. Detektion af HCV i blodet ved hjælp af PCR er en mere informativ diagnostisk metode. Påvisningen af HCV RNA i PCR vidner for viremia, gør det muligt at bedømme replikationen af viruset i kroppen og tjener som et af kriterierne for effektiviteten af antiviral terapi. Påvisning af HCV RNA ved PCR i de tidlige stadier af udviklingen af en virusinfektion mod baggrunden for fuldstændig fravær af serologiske markører kan tjene som de tidligste tegn på infektion. Den isolerede påvisning af HCV RNA mod baggrunden for fuldstændig fravær af andre serologiske markører kan imidlertid ikke fuldstændigt eliminere det falske positive resultat af PCR. I sådanne tilfælde er en omfattende evaluering af kliniske, biokemiske og morfologiske undersøgelser nødvendig med gentagen gentagen bekræftelse af forekomsten af PCR-infektion.

Af stor betydning er anvendelsen af PCR-metoden hos patienter med kronisk viral hepatitis C, da der i de fleste af dem ikke er nogen sammenhæng mellem tilstedeværelsen af viral replikation og leverenzymernes aktivitet. I sådanne tilfælde tillader kun PCR at dømme tilstedeværelsen af viral replikation, især hvis slutresultatet udtrykkes kvantitativt. I de fleste tilfælde forekommer forsvinden af HCV RNA fra blodserum senere end normaliseringen af leverenzymer, så deres normalisering kan ikke tjene som grundlag for at stoppe antiviral behandling.

Det er praktisk taget vigtigt for påvisning af HCV RNA at undersøge ved PCR-metode ikke kun serum, men også lymfocytter, hepatobiobaptam. Virus kan opdages 2-3 gange oftere i levervæv end i serum. Ved evaluering af resultaterne af undersøgelsen af blodserum for HCV RNA skal det huskes, at viremi kan variere i naturen (som ændringen i enzymaktivitet). Derfor kan der efter positive resultater af PCR-undersøgelsen opnås et negativt resultat og omvendt. I sådanne tilfælde er det bedre at undersøge hepatobiobater for at løse de tvivl, der opstår.

Påvisning af HCV RNA i et materiale, der anvender PCR, anvendes til følgende formål:

• løsning af tvivlsomme resultater af serologiske undersøgelser
• differentiering af viral hepatitis C fra andre former for hepatitis;
• påvisning af den akutte fase af sygdommen i sammenligning med den overførte infektion eller kontakt; Infektionsstadiet hos nyfødte fra seropositive HCV-mødre;
• overvågning af effektiviteten af antiviral behandling.

Patienter med mistænkt viral hepatitis C:

• donorer;
• personer med risikofaktorer
• personer med øget aktivitet af ALT;
• patienter med akut hepatitis

Alle ovennævnte egenskaber ved evaluering af resultater og fremgangsmåder til diagnosticering af HCV ved anvendelse af PCR gælder også for andre infektioner.

PCR-metoden tillader ikke kun at detektere HCV RNA i testmaterialet, men også at etablere sin genotype. Bestemmelse af virusets genotype er af stor betydning for udvælgelsen af patienter med kronisk viral hepatitis C til behandling af interferon-alfa og ribavirin. Laboratorieindikationer til behandling af kronisk viral hepatitis C med interferon alfa er som følger:

• øget transaminaseaktivitet
• tilstedeværelse af HCV RNA i blodet;
• genotype 1 HCV;
• høj viremi i blodet (mere end 8 × 10 ⁵ kopier / ml).

I øjeblikket kan HCV RNA-indhold i blodserum kvantificeres ved PCR, hvilket er af stor betydning for kontrollen af interferon alfa-behandling. Niveauet af viremia vurderes som følger: for HCV RNA fra 10 ² til 10 ⁴ kopier / ml - svag; fra 10 ⁵ til 10 ⁷ kopier / ml - medium, over 10 ⁸ kopier / ml - høj. Med effektiv behandling falder niveauet af viremia.

[1], [2], [3], [4]