Infektiøs mononukleose: Antistoffer mod Epstein-Barr-viruset i blodet

Infektiøs mononukleose er en almindelig systemisk lymfoproliferativ sygdom, som oftest skyldes Epstein-Barr-viruset. Toxoplasma gondii og andre vira (CMV, human immunodeficiency virus og human herpesvirus type 6, anerkendt som årsag til pludselige exanthema) kan forårsage klinisk lignende sygdomme. Disse samme etiologiske midler er formodentlig i stand til at forårsage udviklingen af kronisk træthedssyndrom.

Epstein-Barr-virus er en virus fra herpes-gruppen, der har en tropisme for B-lymfocytter, fortsætter i lang tid i værtscellerne som en latent infektion. Det er bredt udbredt over hele verden. Af struktur og størrelse er Epstein-Barr-virus skelnes fra andre herpesvirus, men adskiller sig væsentligt fra dem i antigeniske egenskaber. Virusen har et membran antigen (MA-membran antigen), et nukleært antigen (EBNA-Epstein-Barris nukleins antigen) og et viralt capsid antigen (VCA).

Infektion opstår, når viruset overføres med spyt. Epstein-Barr virus, når de indtages inficerer svælg epitel, der forårsager betændelse og feber - de typiske kliniske tegn begyndte infektiøs mononukleose. Strengt lymfotroft virus, sammenføjning S3α receptor cellemembran B-lymfocytter inducerer proliferation af polyklonale B-lymfocytter med en tilsvarende stigning i mandlerne, systemisk lymfadenopati og splenomegali. B-lymfocytter transformeres (erhverve evnen til uendelig division), og i mangel af et tilstrækkeligt cellulært immunrespons, kan denne proces udvikle sig naturligvis ondartet (fx X-bundet lymfoproliferativt syndrom). Hvis de cellulære immunitetsfaktorer styrer replikationen af Epstein-Barr-viruset i kroppen, forsvinder de kliniske symptomer på infektiøs mononukleose gradvist.

Ligesom andre herpesvira, kan Epstein-Barr virus fortsætter i en latent infektion (dens DNA indeholdt i kernen af en lille mængde af B-lymfocytter). Episodisk asymptomatisk reaktivering af infektion - et almindeligt fænomen, ca. 20% af raske unge mennesker udskiller virus Epstein-Barr virus med spyt. Hos personer med en beskadiget cellulær immunitet (f.eks AIDS, ataksi-telangiectasia, i transplantatmodtagere), kan udvikle en klar reaktiv infektion med håret leukoplaki, interstitiel pneumoni, eller i form af et monoklonalt B-celle lymfom. Med Epstein-Barr-virus er etiologien af nasopharyngeal carcinoma og Burkitt's lymfom forbundet.

Et af manifestationerne af infektiøs mononukleose er udseendet i perifert blod af atypiske lymfocytter (op til 10% af det totale antal lymfocytter). Atypiske lymfocytter findes i blodet fra begyndelsen af perioden af kliniske manifestationer af infektionen. Deres indhold i blodet når et højdepunkt i slutningen af 2. Eller 3. Uge, og kan holde på dette niveau op til 1,5-2 måneder. En fuldstændig forsvindelse opstår normalt i begyndelsen af den 4. Måned efter sygdommens begyndelse. Tilstedeværelsen af atypiske lymfocytter er et relativt ufølsomt tegn på infektion forårsaget af Epstein-Barr-virusen, men har en samlet specificitet på ca. 95%.

Proliferation af polyklonale B-lymfocytter i infektion forårsaget af Epstein-Barr virus, genererer en lang række autoantistoffer i patienten, såsom IgM-anti-i (kold agglutinin), rheumatoid faktor, antinukleære antistoffer. De fleste af de usædvanlige Ig'er, der forekommer i infektiøs mononukleose, kaldes Paul-Bunnel heterophile antistoffer. Disse antistoffer hører til klassen IgM, de har en affinitet for lam og hest røde blodlegemer, er ikke rettet mod ethvert antigen Epstein-Barr virus. Heterofile antistoffer - Tilfældige produkter B-lymfoide spredning (forårsaget af Epstein-Barr-virus), vises de i den første uge af infektiøs mononukleose og gradvist forsvinde under rekonvalescens, er de som regel ikke påvist i 3-6 måneder.

Da det første akutte infektions stadium bliver latent, forekommer genomerne af Epstein-Barr-viruset (unikke antigener) stort set i alle celler, og det nukleare antigen frigives i miljøet. Som svar på antigenet syntetiseres specifikke antistoffer - værdifulde markører af sygdomsfasen. Kort efter infektion af B-lymfocytter detekteres et tidligt antigen (EA), et protein der kræves til replikation af Epstein-Barr-viruset (og ikke en strukturel viral komponent). Til det tidlige antigen i patientens krop syntetiseres antistoffer af klasser IgM og IgG. Sammen med Epstein-Barr-virusets fulde virus forekommer antigener af viralkapsidet (VCA) og membrantigenet (MA). Efterhånden som den infektiøse proces aftager, undgår en lille procentdel af B-lymfocytter inficeret med Epstein-Barr-virusen immunforstærkning og bevarer det virale genom i latent form. Det nukleare antigen (EBNA) af Epstein-Barr-viruset er ansvarlig for dets overlapning og overlevelse.

Laboratorieundersøgelser kan detektere antistoffer mod forskellige antigener.

Fra de serologiske metoder til diagnosticering af infektiøs mononukleose er Paul-Bunnel-reaktionen (agglutination) mest almindelig med det formål at detektere heterofile antistoffer i serum. Titeren af heterofile antistoffer 1: 224 og højere i patientens serum er anerkendt som diagnostisk signifikant, hvilket bekræfter diagnosen infektiøs mononukleose. Heterofil agglutination er positiv hos 60% af de unge efter 2 uger og i 90% efter 4 uger fra starten af kliniske manifestationer af sygdommen. Derfor er der behov for flere undersøgelser for at diagnosticere infektiøs mononukleose: i sygdommens første uge (reaktionen kan være negativ) og 1-2 uger senere (reaktionen kan blive positiv). Indholdet af heterofile antistoffer falder efter afslutningen af den akutte periode af den infektiøse proces, men deres titer kan bestemmes inden for 9 måneder efter begyndelsen af kliniske symptomer. Paul-Bunnel-reaktionen kan vende fra positiv til negativ, selv mod baggrunden for de resterende hæmatologiske og kliniske symptomer hos patienten. Følsomheden af metoden hos voksne er 98%, specificitet er 99%. I børn med infektiøs mononukleose i en alder af 2 år heterofile antistoffer blev kun påvist hos 30% af patienter i alderen 2-4 år - 75% over 4 år - mere end 90%. Metodens følsomhed hos børn er mindre end 70%, specificiteten er 20%. Reduktion, og derefter genforøgelse af titeren af heterofile antistoffer kan forekomme som reaktion på en anden infektion (oftest i virale infektioner i det øvre luftveje). Paul-Bunnel-svaret er ikke specifikt for Epstein-Barr-viruset. Titeren af heterofile antistoffer giver ikke en krydsreaktion og korrelerer ikke med specifikke antistoffer mod Epstein-Barr-virusen, og det korrelerer heller ikke med sværhedsgraden af sygdomsforløbet. Prøven er ubrugelig til diagnosticering af den kroniske form af infektiøs mononukleose (positiv i gennemsnit kun hos 10% af patienterne).

Titers 1:56 eller mindre kan findes hos raske mennesker og hos patienter med andre sygdomme (rheumatoid arthritis, rubella). Falske positive testresultater mødes meget sjældent.

I øjeblikket anvendes metoden til "single spot" (glidende agglutination) til at bestemme antistoffer mod erythrocytter af en ram, den anvendes oprindeligt som en screening test. Ved følsomhed kan den sammenlignes med Paul-Bunnel-reaktionen. Slide falske positive prøver kan være omkring 2% af studierne (leukæmi, malignt lymfom, malaria, røde hunde, viral hepatitis, carcinom i bugspytkirtlen) og falsk-negative voksne - 5-7% af tilfældene.

Det skal bemærkes, at spektret af diagnostiske testsystemer produceret af firmaer baseret på bestemmelse af antistoftiter er meget bredt, så det er nødvendigt at fokusere på den diagnostiske titer af antistoffer, der er specificeret i instruktionerne for testsystemer.

Hvis heterofile antistoffer ikke er identificeret, og klinisk billede svarer til infektiøs mononukleose, er det nødvendigt at undersøge serum for specifikke antistoffer af IgM og IgG. Til påvisning af specifikke antistoffer mod Epstein-Barr virus ved anvendelse af indirekte immunofluorescens metoder (tillade til påvisning af antistoffer VCA og EA-antigener) antialexin-immunofluorescens (påvisning af antistoffer mod EA, VCA og EBNA-antigen) og IFA.

Antistoffer mod EA-antigen D-komponenten (anti-EA-D) forekommer selv i den primære infektionens latente periode og forsvinder hurtigt med genopretning.

Antistoffer mod EA-antigenet R-komponenten (anti-EA-R) kan påvises 3-4 uger efter sygdommens kliniske manifestationer. De vedvarer i blodserumet i omkring et år, ofte opdaget med atypiske eller langvarige strømme af infektiøs mononukleose. Normalt findes disse antistoffer med Burkitt's lymfom.

Antistoffer mod VCA klasse IgM (anti-VCA IgM) forekommer meget tidligt, normalt til kliniske symptomer, de opdages ved sygdommens begyndelse i 100% af tilfældene. Høje titre forekommer i 1-6 uger fra infektionens begyndelse, de begynder at falde fra 3. Uge og forsvinder normalt efter 1-6 måneder. Anti-VCA IgM er næsten altid til stede i serum med aktiv infektion, så metoden til deres påvisning er meget følsom og specifik for en akut episode af infektiøs mononukleose.

Antistoffer mod VCA klasse IgG (anti-VCA IgG) kan forekomme tidligt (i 1-4 uger), deres mængde når en højde ved sygdommens 2. Måned. I begyndelsen af sygdommen findes de i 100% af tilfældene. Kun 20% af patienterne viste en 4 gange stigning i titeren i studiet af parret sera. Titerne falder ved genopretning, men findes inden for flere år efter den overførte infektion, og det er derfor ubrugeligt til diagnosticering af infektiøs mononukleose. Tilstedeværelsen af anti-VCA IgG indikerer en tilstand efter infektion og immunitet.

Antistoffer mod EBNA (anti-EBNA) vises senere end alle, er sjældent til stede i den akutte fase af sygdommen. Deres indhold stiger i løbet af genopretningsperioden (inden for 3-12 måneder), de kan fortsætte i blodet i mange år efter sygdommen. Manglen på anti-EBNA i nærvær af anti-VCA IgM og anti-EA IgM indikerer en nuværende infektion. Påvisningen af anti-EBNA efter en tidligere negativ reaktion indikerer en eksisterende infektion. Ved anvendelse af ELISA-metoden er det muligt samtidig at detektere tilstedeværelsen af anti-EBNA-klasser af IgM og IgG. Hvis mængden af anti-EBNA IgM er større end anti-EBNA IgG, bør en akut infektion overvejes, med det omvendte forhold som det forrige.

Til fordel for en akut primær infektion indikerer et eller flere af følgende symptomer tilstedeværelsen af:

• anti-VCA IgG (detekteres tidligt, og senere er indholdet reduceret);
• Højtiter (mere end 1: 320) eller 4 gange stigning i titeren af anti-VCA IgG i løbet af sygdommen;
• en forbigående stigning i titer af anti-EA-D (1:10 eller mere);
• tidlig anti-VCA IgG uden anti-EBNA, og senere - fremkomsten af anti-EBNA.

Akut eller primær infektion forårsaget af Epstein-Barr-virus er udelukket, hvis anti-VCA IgG og anti-EBNA titrene i serum ikke ændres, når de testes i dynamik (akut periode og genopretning).

Den konstante tilstedeværelse af tidligt antigen og anti-VCA IgG i høje titere indikerer en kronisk fase af infektion.

Påvisningen af antistoffer mod Epstein-Barr-viruset anvendes til at diagnosticere infektiøs mononukleose og kroniske infektioner forårsaget af Epstein-Barr-viruset.

Kan påvises antistoffer mod Epstein-Barr-virus i de følgende sygdomme: sekundær immundefekt, herunder HIV-infektion, nasopharyngeal carcinom, Burkitts lymfom, CMV-infektion, syfilis, Lyme sygdom, brucellose og andre.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7]