Antibiotikaresistensbestemmelse: forberedelse, afkodning, hvor meget der gøres

I dag bliver antibiotikafølsomhedstestning stadig mere populært. Den menneskelige mikroflora er ret forskelligartet og repræsenteret af et stort antal mikroorganismer i forskellige biotoper.

Farmaceutiske virksomheder har udviklet et stort antal antibakterielle midler, antibiotika, som hjælper med at opretholde et normalt forhold og antal mikrobielle populationer. Med begyndelsen af antibiotikaæraen er mange sygdomme, der tidligere blev betragtet som dødelige, blevet helbredt. Men mikroorganismer stræber også efter at overleve og tilpasser sig gradvist virkningen af antibakterielle lægemidler. Med tiden har mange af dem erhvervet resistens over for mange lægemidler, fikseret den i genotypen og begyndt at give den videre fra generation til generation. Således er nye mikroorganismer i starten ufølsomme over for visse lægemidler, og deres anvendelse kan være ineffektiv. Farmaceuter udvikler flere og flere nye produkter, tilføjer nye aktive komponenter til dem og ændrer den grundlæggende formel. Men gradvist udvikles der også resistens over for dem.

Årsagen til mikrofloraens øgede resistens over for mange lægemidler, og endda deres analoger, ligger ofte i forkert og ukontrolleret brug af antibiotika. Læger ordinerer antibiotika og deres kombinationer til forskellige bakteriesygdomme. Samtidig er der ingen foreløbig vurdering af, hvor effektive de vil være, og den optimale dosis vælges ikke, hvilket er meget vigtigt både for behandling og for at forhindre mekanismerne for udvikling af yderligere resistens. Mange ordinerer fejlagtigt antibakteriel behandling, selv for virussygdomme, hvilket er ineffektivt, da antibiotikummet ikke virker mod virus.

Terapi ordineres ofte uden forudgående følsomhedstest, og valget af det aktive stof og den nødvendige dosis for hver specifik sygdom og biotop udføres ikke. Da antibiotika ordineres "blindt", er der ofte tilfælde, hvor de ikke viser nogen aktivitet mod de mikroorganismer, der forårsagede sygdommen, og hvis antal skal reduceres. I stedet påvirker de andre repræsentanter for mikrofloraen, hvilket resulterer i dysbakteriose, som også er en ret farlig patologi og kan føre til alvorlige konsekvenser. Særligt farlige er tilfælde, hvor et antibiotikum ødelægger den normale mikroflora, som er designet til at beskytte kroppen og opretholde dens normale funktion. Der er også tilfælde, hvor der ordineres for meget eller for lidt af lægemidlet.

Patienter er også uansvarlige omkring behandling. Ofte stoppes behandlingen, når sygdommens symptomer er ophørt med at genere. Samtidig foretrækker mange ikke at gennemføre hele kuren. Dette er en af de faktorer, der bidrager til udviklingen af resistens hos bakterier. Hele kuren er designet til fuldstændigt at dræbe patogen mikroflora. Hvis kuren ikke gennemføres, dræbes den ikke fuldstændigt. De mikroorganismer, der overlever, gennemgår mutationer, udvikler mekanismer, der giver dem beskyttelse mod dette lægemiddel og giver det videre til de næste generationer. Faren er, at der udvikles resistens ikke kun i forhold til dette specifikke lægemiddel, men også til hele lægemiddelgruppen.

Derfor er et af de mest effektive midler til rationel behandling og forebyggelse af resistens i dag den indledende bestemmelse af følsomhed over for det ordinerede lægemiddel og valget af dets optimale dosering.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ]

Indikationer for proceduren Antibiotika-følsomhedstest

Normalt bør en sådan analyse udføres i alle tilfælde, hvor antibakteriel behandling er påkrævet. Baseret på de grundlæggende love for antibiotikabehandling kan ethvert antibiotikum kun ordineres efter en foreløbig vurdering af mikrofloraens følsomhed over for dette middel, og den optimale koncentration af det aktive stof er bestemt under laboratorieforhold. I praksis udføres en sådan undersøgelse ikke før behandlingsstart af forskellige årsager og omstændigheder, og lægen er tvunget til at vælge et lægemiddel "tilfældigt".

I dag udføres følsomhedstestning kun i tilfælde, hvor lægen har alvorlig tvivl om, hvorvidt det ordinerede lægemiddel vil være effektivt, i tilfælde af langvarig mangel på effekt fra lægemidlet, og også når det samme lægemiddel bruges gentagne gange i en begrænset periode. Følsomhed bestemmes ofte i behandlingen af seksuelt overførte sygdomme. Mange specialister vender sig til analyse i tilfælde af bivirkninger, allergiske reaktioner, og når det er nødvendigt at erstatte et lægemiddel med et andet.

Analysen bruges også ofte til at udvælge lægemidler til antibakteriel behandling i restitutionsperioden efter operationer, laparoskopiske indgreb og organfjernelse. På kirurgiske og purulent kirurgiske afdelinger er en sådan undersøgelse simpelthen nødvendig, da resistens udvikles ret hurtigt her. Derudover udvikles superresistente "hospitalserhvervede" lægemidler. Mange private klinikker tager ordination af lægemidler med fuldt ansvar - kun efter at have kontrolleret følsomheden. I mange tilfælde tillader statslige institutioners budget simpelthen ikke at udføre sådanne undersøgelser for hver patient, der har brug for antibakteriel behandling.

[ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]

Forberedelse

Forberedelse til undersøgelsen kræver ingen særlige foranstaltninger. Det er det samme som for alle andre tests. Et par dage før undersøgelsen bør du afstå fra at drikke alkohol. Om morgenen, på dagen for indsamling af materialet, må du i de fleste tilfælde ikke spise eller drikke. Men alt afhænger af analysetypen. Materialet til undersøgelsen kan være forskelligt afhængigt af sygdommen.

Ved sygdomme i hals og luftveje tages en podning fra halsen og næsen. Inden for venerologi, gynækologi og urologi tages der podninger fra kønsorganerne og blod til analyse. Ved nyresygdomme kræves ofte urin. Ved mave-tarmsygdomme og visse infektionssygdomme undersøges afføring og opkast. Nogle gange kan modermælk, næseflåd, øjensekret, spyt og opspyt undersøges. Ved alvorlige patologier og mistanke om en infektiøs proces undersøges endda cerebrospinalvæske. Spektret er ret bredt.

Materialets opsamlingsegenskaber bestemmes af dets biologiske tilhørsforhold. Urin og afføring opsamles således om morgenen i en ren beholder eller i en speciel beholder til biologisk materiale. Modermælk opsamles før fodring. Den midterste del tages til undersøgelse. Udstryget opsamles med en speciel vatpind, som føres langs slimhinderne og derefter nedsænkes i et reagensglas med et forberedt medium. Blod opsamles i et reagensglas, fra en finger eller vene. Ved opsamling af udstrygning fra urinrøret eller vagina anbefales det at afstå fra samleje i flere dage.

Når man indsamler biologisk materiale til forskning, er det først og fremmest nødvendigt at sikre korrekt indsamling og sterilitet. Men i de fleste tilfælde er dette en bekymring for det medicinske personale, patienten bør ikke bekymre sig om dette. Oftest henvender gynækologer og urologer sig til sådanne undersøgelser, for det andet - øre-næse-hals-læger i behandlingen af sygdomme i nasopharynx og pharynx samt øvre luftveje.

[ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

Teknik Antibiotika-følsomhedstest

Det indsamlede biologiske materiale leveres til laboratoriet under sterile forhold, hvor yderligere forskning udføres. Først udføres dets primære såning på universelle næringsmedier. En del af materialet udtages også til mikroskopisk undersøgelse. Der udarbejdes et smear til mikroskopi, og der udføres en undersøgelse, hvorved det er muligt at bestemme et omtrentligt billede og at antage, hvilke mikroorganismer der er til stede i prøven. Dette gør det muligt at vælge de mest optimale miljøer til yderligere forskning og identifikation af mikroorganismer. Tegn på inflammation og onkologiske processer kan også ses ved mikroskopi.

I løbet af flere dage vokser kolonier af mikroorganismer i en petriskål. Derefter tages flere kolonier og overføres til selektive næringsmedier, som gør det muligt at bestemme en omtrentlig gruppe af mikroorganismer. De inkuberes i flere dage i en termostat, og derefter begynder identifikationen (bestemmelse af mikroorganismens type). Identifikationen udføres ved hjælp af specielle biokemiske og genetiske tests, identifikatorer. Derudover kan immunologiske undersøgelser udføres.

Efter at hovedpatogenet er blevet isoleret, vurderes dets følsomhed over for antibiotika. Der findes flere metoder til dette. Den mest almindeligt anvendte metode er seriel fortynding eller skivediffusionsmetoden. Metoderne er beskrevet detaljeret i mikrobiologiske opslagsværker, retningslinjer og laboratoriestandarder.

Essensen af skivediffusionsmetoden er, at identificerede mikroorganismer sås på et næringsmedium, og specielle skiver dyppet i antibiotika placeres ovenpå. Såningen inkuberes i en termostat i flere dage, hvorefter resultaterne måles. Graden af bakterievæksthæmning fra hvert antibiotikum vurderes. Hvis bakterien er følsom over for antibiotikumet, dannes en "lysezone" omkring skiven, hvor bakterierne ikke formerer sig. Deres vækst er langsom eller helt fraværende. Diameteren af væksthæmningszonen bruges til at bestemme graden af mikroorganismers følsomhed over for antibiotikumet og formulere yderligere anbefalinger.

Seriefortyndingsmetoden er den mest præcise. Til dette formål sås mikroorganismer på flydende næringsmedier, og et antibiotikum fortyndet i henhold til decimalfortyndingssystemet tilsættes. Derefter placeres reagensglassene i en termostat til inkubation i flere dage. Følsomhed over for antibiotika bestemmes af graden af bakterievækst i næringsvæksten med tilsætning af antibiotika. Minimumskoncentrationen, hvor mikroorganismer stadig vokser, registreres. Dette er minimumsdosis af lægemidlet (genberegning fra mikrobiologiske enheder til det aktive stof er nødvendig).

Disse er standard mikrobiologiske metoder, der danner grundlag for enhver forskning. De indebærer manuel udførelse af alle manipulationer. I dag er mange laboratorier udstyret med specialudstyr, der udfører alle disse procedurer automatisk. En specialist, der arbejder med sådant udstyr, behøver kun at være i stand til at arbejde med udstyret og overholde sikkerheds- og sterilitetsregler.

Det er nødvendigt at tage højde for, at følsomhedsindekserne under laboratorieforhold og i levende organismer varierer markant. Derfor ordineres en person en højere dosis end bestemt under undersøgelsen. Dette skyldes, at kroppen ikke har så optimale betingelser for bakterievækst. I laboratoriet skabes "ideelle betingelser". En del af lægemidlet kan neutraliseres ved hjælp af spyt og mavesaft. En del neutraliseres i blodet af antistoffer og antitoksiner produceret af immunsystemet.

Urin antibiotikafølsomhedstest

Først indsamles biologisk materiale. For at gøre dette skal du indsamle den midterste del af morgenurinen og levere den til laboratoriet. Det er vigtigt at opretholde sterilitet og ikke tage antibiotika i flere dage før analysen, ellers kan du få et falsk negativt resultat. Derefter udføres en standardsåning, hvis essens er at isolere en renkultur af patogenet og vælge et antibiotikum, der vil have en optimal bakteriedræbende effekt på det. Den nødvendige koncentration af antibiotikumet bestemmes.

Urinanalyse ordineres oftest, når der er mistanke om en infektiøs og inflammatorisk proces i det urogenitale system, med immundefekter og metaboliske forstyrrelser. Normalt er urin en steril væske. Varigheden af en sådan undersøgelse er 1-10 dage og bestemmes af mikroorganismens væksthastighed.

Kultur- og antibiotikafølsomhedstest

Undersøgelsen involverer isolering af den mikroorganisme, der er patogenen, i en renkultur. Nogle gange kan der være flere sådanne mikroorganismer (blandet infektion). Nogle mikroorganismer er i stand til at danne biofilm, som er en slags "mikrobielle samfund". Overlevelsesraten for biofilm er meget højere end for enkelte mikroorganismer eller sammenslutninger. Derudover er ikke alle antibiotika i stand til at påvirke biofilmen og trænge ind i den.

For at bestemme patogenet og isolere det til renkultur, udføres såning. Under undersøgelsen udføres flere såninger i forskellige næringsmedier. Derefter isoleres en renkultur, dens biologiske tilhørsforhold bestemmes, og følsomheden over for antibakterielle lægemidler bestemmes. Den optimale koncentration vælges.

Ethvert biologisk materiale kan anvendes til undersøgelsen, afhængigt af sygdommen og lokaliseringen af den infektiøse proces. Varigheden bestemmes af mikroorganismernes væksthastighed.

[ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ], [ 20 ]

Test for afføringsfølsomhed

Afføring undersøges ved forskellige mave- og tarmsygdomme, i tilfælde af mistanke om infektionsprocesser, bakteriel forgiftning eller madforgiftning. Formålet med undersøgelsen er at isolere patogenet og vælge optimale antibakterielle lægemidler til det, som vil have høj aktivitet. Vigtigheden af denne type undersøgelse er, at det er muligt at vælge et lægemiddel, der kun vil påvirke patogenet og ikke vil påvirke repræsentanter for den normale mikroflora.

Det første og meget vigtige trin er opsamling af afføring. Den skal opsamles i en speciel steril beholder om morgenen. Den bør opbevares i højst 1-2 timer. Kvinder med menstruation bør udsætte analysen til slutningen, da resultaternes nøjagtighed vil ændre sig. Materialet leveres til laboratoriet til testning. Analysen udføres ved hjælp af standard mikrobiologiske teknikker til såning og isolering af en renkultur. Der udføres også et antibiogram. Baseret på konklusionen udvikles anbefalinger, og et yderligere studieprogram fastlægges.

[ 21 ], [ 22 ], [ 23 ], [ 24 ]

Dysbakterioseanalyse med følsomhed

Materialet til undersøgelsen er afføring taget umiddelbart efter afføring. Den normale mikroflora i mave-tarmkanalen består af repræsentanter for normalfloraen og flere repræsentanter for patogen flora. Deres artssammensætning, mængde og forhold er strengt defineret og holdes inden for den tilladte norm. Hvis dette forhold forstyrres, udvikles dysbakteriose. Det kan manifestere sig på forskellige måder. Infektionssygdomme kan udvikle sig, hvis mængden af patogen mikroflora stiger kraftigt. Hvis mængden af en mikroorganisme falder kraftigt, optages det frie rum af andre repræsentanter, der ikke er typiske for mave-tarmkanalen, eller som er patogene. Ofte optages det frie rum af en svamp, hvorefter forskellige svampeinfektioner og candidiasis udvikles.

For at bestemme den kvantitative og kvalitative sammensætning af tarmmikrofloraen udføres en afføringsanalyse for dysbakteriose. Konventionelt er alle repræsentanter, der lever i tarmen, opdelt i tre grupper: patogene, opportunistiske og ikke-patogene. Analysen består derfor af tre dele. Hver gruppe af mikroorganismer har sine egne behov for en fødekilde, energi. Hver gruppe kræver separate næringsmedier og selektive tilsætningsstoffer.

Først udføres mikroskopi og primær såning. Derefter, efter såning, udvælges de største kolonier, der ligner repræsentanter for hver gruppe i morfologiske træk. De overføres til selektive medier. Når mikroorganismerne er vokset, identificeres de og testes straks for følsomhed over for antibiotika. Standard mikrobiologiske metoder anvendes.

Undersøgelsen af en gruppe patogene mikroorganismer, udover standardundersøgelser, involverer bestemmelse af tyfus-, paratyfus- og dysenteribakterier. Det bestemmes også, om en person er bærer af disse mikroorganismer. En omfattende undersøgelse for dysbakteriose omfatter også en undersøgelse af repræsentanter for bifidobakterie- og lactobaciller-gruppen. Undersøgelsen tager cirka en uge og afhænger af mikroorganismernes væksthastighed.

[ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ]

Testning af bakteriofagfølsomhed

I tilfælde af tarminfektion anvendes bakteriofager ofte til behandling i stedet for antibiotika. Bakteriofager er bakterielle vira, der kun er modtagelige for dem. De finder en bakterie, som de komplementerer, trænger ind i den og ødelægger gradvist bakteriecellen. Som følge heraf stopper den infektionsmæssige proces. Men ikke alle bakterier er følsomme over for bakteriofager. For at kontrollere, om en given bakteriofag vil vise aktivitet over for repræsentanter for mikrofloraen, skal der udføres en analyse.

Materialet til undersøgelsen er afføring. Analysen skal leveres til laboratoriet inden for en time, ellers vil den være umulig at udføre. Det er nødvendigt at udføre analysen i flere gentagelser. Den indledende metode ligner den, der bruges til at bestemme følsomhed over for antibiotika. Først udføres en indledende mikroskopi af prøven, derefter primær såning på universelle næringsmedier. Derefter isoleres en renkultur på selektive næringsmedier.

Hovedarbejdet udføres med renkultur. De behandles med forskellige typer bakteriofager. Hvis kolonien opløses (lyserer), indikerer dette høj aktivitet af bakteriofagen. Hvis lysis er delvis, fungerer bakteriofagen moderat. I fravær af lysis kan vi tale om resistens over for bakteriofagen.

Fordelen ved fagterapi er, at bakteriofager ikke påvirker menneskekroppen og ikke forårsager bivirkninger. De binder sig til bestemte typer bakterier og lyserer dem. Ulempen er, at de er meget specifikke og har en selektiv effekt, og ikke altid kan binde sig til bakterier.

[ 30 ], [ 31 ], [ 32 ], [ 33 ], [ 34 ], [ 35 ], [ 36 ], [ 37 ], [ 38 ]

Sputumanalyse for antibiotikafølsomhed

Analysen er en undersøgelse af udskillelsen fra de nedre luftveje. Målet er at bestemme typen af mikroorganismer, der fungerer som årsag til sygdommen. Der udføres også et antibiogram. I dette tilfælde bestemmes patogenets følsomhed over for antibiotika, og den optimale koncentration vælges. Det bruges til sygdomme i luftvejene.

Undersøgelse af sputum og andet indhold i lunger og bronkier er nødvendig for at vælge et behandlingsregime og for at differentiere mellem forskellige diagnoser. Det bruges til at bekræfte eller afkræfte tilstedeværelsen af tuberkulose.

Først er det nødvendigt at udtage biologisk materiale. Det kan udtages ved hoste, ved ekspektoration eller ved at tage det fra luftrøret under bronkoskopi. Der findes specielle aerosoler, der fremmer ekspektoration. Før der tages sputum, skal munden skylles med vand, hvilket vil reducere graden af bakteriel kontaminering af mundhulen. Først anbefales det at tage 3 dybe indåndinger og fremkalde en produktiv hoste. Sputum kan også tages ved aspiration fra luftrøret. I dette tilfælde indsættes et specielt kateter i luftrøret. Under bronkoskopi indsættes et bronkoskop i bronkialhulen. I dette tilfælde smøres slimhinden med et bedøvelsesmiddel.

Materialet sendes derefter til laboratoriet til testning. Standardsåning og mikroskopi udføres. En renkultur isoleres derefter, og yderligere manipulationer udføres med den. Der udføres et antibiogram, hvilket gør det muligt at identificere spektret af bakteriel følsomhed og vælge den optimale dosis.

Hvis der er mistanke om tuberkulose, undersøges morgenens sputum i tre dage. Ved test for tuberkulose vil resultatet være klart om 3-4 uger. Da mycobacterium tuberculosis, som er sygdommens forårsagende agens, vokser meget langsomt.

Normalt bør repræsentanter for normal mikroflora i luftvejene detekteres. Det er også nødvendigt at tage højde for, at indikatorerne for normal mikroflora kan variere med nedsat immunitet.

Sædprøve for antibiotikafølsomhed

Det er en bakteriologisk undersøgelse af sædcellens ejakulat med efterfølgende udvælgelse af følsomme antibiotika og deres koncentrationer. Oftest udføres det i behandlingen af infertilitet og andre sygdomme i det mandlige reproduktionssystem. I tilfælde af at sygdommen er ledsaget af en infektiøs proces. Hovedårsagen til mandlig infertilitet er i de fleste tilfælde en infektion. Normalt udføres der først et spermogram. Baseret på resultaterne fastslås sædcellens befrugtningsevne. Hvis der findes et stort antal leukocytter i denne analyse, kan vi tale om en inflammatorisk proces. I dette tilfælde ordineres der normalt straks en mikrobiologisk analyse, da inflammation næsten altid ledsages af en infektion. Baseret på de opnåede resultater vælges passende behandling. Undersøgelsen ordineres normalt af en androlog.

Prostatitis og kønssygdomme er også årsager til at udføre analysen. Det ordineres også, hvis der opdages en kønssygdom hos partneren.

Grundlaget for en korrekt analyse er først og fremmest korrekt indsamling af biologisk materiale. Materialet opsamles i specielle beholdere med bred hals. Opbevaringstemperaturen bør svare til menneskekroppens temperatur. I dette tilfælde kan materialet opbevares i højst en time. I frossen form kan det opbevares i højst en dag. Det er uhensigtsmæssigt at tage en dyrkning under indtagelse af antibiotika, da dette ændrer det kliniske billede. Normalt tages dyrkningen, før antibiotikabehandlingen påbegyndes. Eller man kan stoppe med at tage medicin 2-3 dage før analysen.

Derefter sås den på et næringsmedium. Inkuberes i en termostat i 1-2 dage. Derefter isoleres en renkultur, hvorefter der foretages identifikation, følsomhed bestemmes, samt typen og vækstraten for hver koloni. Følsomhed over for antibiotika bestemmes, hvis der detekteres patogene mikroorganismer. Analysen tager i gennemsnit 5-7 dage.

[ 39 ], [ 40 ], [ 41 ], [ 42 ], [ 43 ]

Glutenfølsomhedstest

Der findes mange tests, der kan bruges til at bestemme immunologisk følsomhed over for forskellige stoffer eller patogener. Tidligere var den primære metode at udføre tests baseret på agglutinationsreaktionen af antistoffer og antigener. I dag bruges disse tests mindre og mindre, da deres følsomhed er meget lavere end mange moderne metoder, såsom glutentests. Oftest tyr man i praksis til en spyttest til gluten- og afføringsanalyse.

Glutenfølsomhedstesten bruges til at diagnosticere forskellige tarmlidelser. Den er baseret på immunsystemets reaktion. Hvis gluten tilsættes afføringen, opstår eller udebliver reaktionen. Dette betragtes som et falsk positivt eller falsk negativt resultat. Et positivt resultat indikerer en prædisposition for colitis, en høj sandsynlighed for dens udvikling. Det bekræfter også cøliaki.

Det er også muligt at udføre en glutentest med spyt som biologisk materiale. Det er muligt at måle mængden af antistoffer mod gliadin. Et positivt resultat indikerer følsomhed over for gluten. Dette kan indikere en høj sandsynlighed for diabetes. Hvis begge tests er positive, kan diabetes eller cøliaki bekræftes.

[ 44 ], [ 45 ]

Klamydiafølsomhedstest for antibiotika

Analysen udføres i behandlingen af infektiøse og inflammatoriske sygdomme i urogenitalkanalen, hvis der er mistanke om klamydia. Materialet til undersøgelsen er et skrab fra vaginalslimhinden - hos kvinder et smear fra urinrøret - hos mænd. Indsamlingen udføres i procedurerummet med engangsudstyr. Det er vigtigt at opretholde sterilitet. Før indsamling af materialet bør du afstå fra intimitet i 1-2 dage før undersøgelsens start. Hvis en kvinde har menstruation, indsamles materialet 3 dage efter dets fuldstændige afslutning.

Materialet leveres til laboratoriet. En fuldstændig analyse omfatter en indledende mikroskopi af udstrygningen. Dette gør det muligt visuelt at bestemme mikrofloraen ud fra morfologiske træk og korrekt vælge næringsmedier. Indholdet af slim, pus og epitelpartikler kan direkte eller indirekte indikere udviklingen af en inflammatorisk proces eller malign degeneration af celler.

Derefter udføres primærsåning. Kulturen inkuberes i flere dage i en termostat, og identifikationen udføres baseret på kulturkarakteristika. Derefter overføres kulturen til selektive næringsmedier beregnet til dyrkning af klamydia. De resulterende kolonier identificeres ved hjælp af biokemiske tests. Derefter bestemmes følsomheden over for antibiotika ved hjælp af standardmetoder. Det mest følsomme antibiotikum og dets koncentration udvælges. Specielle medier udviklet specifikt til denne type mikroorganisme, som indeholder alle de nødvendige stoffer og vækstfaktorer, er nødvendige for at dyrke klamydia.

Det er også muligt at udføre en undersøgelse ved hjælp af en biologisk metode. For at gøre dette inficeres rotter med patogenet. I nogle laboratorier anvendes en specielt dyrket vævskultur i stedet for rotter. Dette skyldes, at klamydia er intracellulære parasitter, og der kræves særlige betingelser for deres dyrkning. Derefter bestemmes mikroorganismer ved hjælp af PCR-metoden. For at bestemme følsomheden transplanteres de på et selektivt næringsmedium for klamydia, og efter et par dage registreres resultaterne. Resistens eller følsomhed bedømmes ud fra undertrykkelsen af den infektiøse proces i cellerne.

[ 46 ], [ 47 ], [ 48 ], [ 49 ], [ 50 ], [ 51 ], [ 52 ], [ 53 ]

Hvor lang tid tager det at lave en antibiotikafølsomhedstest?

I gennemsnit udføres analysen inden for 5-7 dage. Nogle analyser tager længere tid. For eksempel skal man ved diagnosticering af tuberkulose vente fra 3 uger til en måned på resultaterne. Alt afhænger af mikroorganismernes vækstrate. Ofte skal laboratoriepersonalet håndtere sager, hvor patienter beder om, at analysen udføres hurtigere. Og de tilbyder endda "ekstra betaling" for hastende behandling. Her skal man dog forstå, at i dette tilfælde afhænger intet af laboratorieassistentens handlinger. Det afhænger kun af, hvor hurtigt mikroorganismen vokser. Hver type har sin egen, strengt definerede vækstrate.

Normal ydeevne

Der findes ingen absolutte universelle normværdier for alle analyser. For det første kan disse værdier variere for hver biotop. For det andet er de individuelle for hver mikroorganisme. Det vil sige, at normværdierne for den samme mikroorganisme, f.eks. for hals og tarme, er forskellige. Så hvis stafylokokker dominerer i halsen som repræsentanter for normal mikroflora, så dominerer E. coli, bifido- og lactobakterier i tarmene. Værdierne for den samme mikroorganisme i forskellige biotoper kan også variere betydeligt. For eksempel kan Candida normalt være til stede i en vis mængde i den urogenitale mikroflora. De er normalt ikke til stede i mundhulen. Tilstedeværelsen af Candida i mundhulen kan indikere deres kunstige introduktion fra deres naturlige habitat.

Urin, blod og cerebrospinalvæske er biologiske miljøer, der normalt bør være sterile, dvs. bør ikke indeholde nogen mikroflora. Tilstedeværelsen af mikroflora i disse væsker indikerer en stærk inflammatorisk, infektiøs proces og indikerer også risiko for udvikling af bakteriæmi og sepsis.

Generelt er der en omtrentlig klassificering. Måleenheden i mikrobiologi er CFU/ml, det vil sige antallet af kolonidannende enheder i 1 milliliter biologisk væske. Graden af kontaminering bestemmes af antallet af CFU og varierer i et bredt interval fra 101 ^til 109. ^Følgelig er ¹⁰¹ det minimale antal mikroorganismer, 109 ^er en alvorlig grad af infektion. Samtidig betragtes området op til 103 ^som normalt, og alle indikatorer over dette tal indikerer patologisk reproduktion af bakterier.

Hvad angår følsomhed over for antibiotika, er alle mikroorganismer opdelt i resistente, moderat følsomme og følsomme. Dette resultat udtrykkes ofte som en kvalitativ egenskab, der angiver MID - den minimale hæmmende dosis af antibiotikumet, som stadig hæmmer mikroorganismens vækst. For hver person, såvel som for hver mikroorganisme, er disse indikatorer strengt individuelle.

[ 54 ], [ 55 ], [ 56 ], [ 57 ]

Enheden til analyse

Ved udførelse af bakteriologiske undersøgelser, især med bestemmelse af antibiotikafølsomhed, vil ét apparat ikke være nok. Et komplet og omfattende udstyr til det bakteriologiske laboratorium er nødvendigt. Det er nødvendigt omhyggeligt at planlægge og vælge udstyr, der svarer til hvert trin i forskningen. Ved indsamling af biologisk materiale er sterile instrumenter, kasser, beholdere, opbevaringskamre og transportudstyr til levering af materialet til laboratoriet nødvendige.

I laboratoriet skal du først og fremmest bruge et mikroskop af høj kvalitet til smearmikroskopi. I dag findes der et stort antal mikroskoper, der har en række forskellige egenskaber - fra traditionelle lysmikroskoper til fasekontrast- og atomkraftmikroskoper. Moderne udstyr giver dig mulighed for at scanne et billede i tredimensionelt rum og undersøge det ved høj forstørrelse med høj nøjagtighed.

I sånings- og inkubationsfasen af mikroorganismer kan autoklaver, tørvarmeskabe, ekssikkatorer, dampbade og en centrifuge være nødvendige. En termostat er påkrævet, hvor den primære inkubation af biologisk materiale finder sted.

I forbindelse med identifikation af mikroorganismer og udførelse af et antibiogram kan mikromanipulatorer, massespektrometre, spektrofotometre og kolorimetre være nødvendige til forskellige beregninger og vurdering af kulturernes biokemiske egenskaber.

Derudover kan moderne laboratorier udstyres med højteknologisk udstyr, der udfører alle de ovennævnte hovedfaser af forskningen, helt op til beregning af resultaterne i automatisk tilstand. Sådanne apparater omfatter for eksempel en kompleks enhed i et bakteriologisk laboratorium baseret på et time-of-flight massespektrometer. Denne serie af apparater gør det muligt at opdele hele laboratoriets område i tre zoner. Den første zone er snavset, hvor test modtages og registreres. Den anden zone er arbejdszonen, hvor den primære mikrobiologiske forskning faktisk udføres. Og den tredje zone er sterilisering og autoklave, hvor forberedelse og bortskaffelse af arbejdsmateriale udføres.

Modellerne muliggør inkubation ved en bred vifte af temperaturer og forhold. Indeholder en indbygget analysator til blod og andre biologiske prøver, som producerer resultater med høj nøjagtighed og pålidelighed. Sættet indeholder elektroniske vægte, bidestillere, centrifuger, autoklaver og steriliseringsskabe, automatisk mediumkoger, vandbad med indbygget omrører, pH-metre, termometre og mikroskoper.

Der anvendes også en mikrobiologisk analysator, hvori de prøver, der skal testes, næringsmedier og sæt af tests til bestemmelse af følsomhed, placeres. Enheden udfører de nødvendige undersøgelser og udsteder en færdig konklusion.

Hævelse og sænkning af værdier

Kun en læge kan tyde analysen. Men ofte går patienter i panik, når de har modtaget resultaterne, og bemærker et stort antal uforståelige symboler og tal. For ikke at fare vild, er det tilrådeligt at have i det mindste en generel idé om, hvordan man tyder analysen af følsomhed over for antibiotika. Normalt angiver det første punkt i resultaterne navnet på den mikroorganisme, der er årsag til sygdommen. Navnet er givet på latin. Det kan også indikere en repræsentant for den normale mikroflora, der hersker i kroppen, så der er ingen grund til panik. Det andet punkt angiver graden af såning, det vil sige antallet af mikroorganismer. Normalt ligger dette tal fra 10 ¹ til 10 ^9. Det tredje punkt angiver formen for patogenicitet, og det fjerde - navnene på antibakterielle lægemidler, som denne mikroorganisme er følsom over for. Den minimale hæmmende koncentration, hvor mikroorganismens vækst undertrykkes, er angivet i nærheden.

[ 58 ], [ 59 ], [ 60 ], [ 61 ], [ 62 ], [ 63 ]