Antibiotikaresistens af mikroorganismer: metoder til bestemmelse

Antibiotika - en af de største resultater inden for medicinsk videnskab, der årligt sparer liv på tiere og hundreder af tusindvis af mennesker. Men som visdom siger, har en gammel kvinde også en udvisning. Hvad tidligere dræbt patogene mikroorganismer, fungerer i dag ikke som det plejede. Så hvad er årsagen: blev antimikrobielle stoffer værre eller på grund af antibiotikaresistens?

Bestemmelse af antibiotikaresistens

Antimikrobielle midler (APM'er), der hedder antibiotika, blev oprindeligt oprettet for at bekæmpe bakterieinfektion. Og på grund af det faktum, at forskellige sygdomme kan forårsage ikke en, men flere forskellige bakterier grupperet sammen, blev udviklingen af stoffer effektivt mod en bestemt gruppe smitsomme stoffer først udført.

Men bakterier, selvom de enkleste, men aktivt udviklende organismer, til sidst erhverver flere og flere nye egenskaber. Instinktet til selvbevarelse og evnen til at tilpasse sig forskellige livsbetingelser gør patogene mikroorganismer stærkere. Som reaktion på truslen mod livet, begynder de selv at udvikle evnen til at modstå det, fremhæve en hemmelighed, der svækker eller fuldstændig neutraliserer virkningen af det aktive stof i antimikrobielle stoffer.

Det viser sig, at når effektive antibiotika blot ophører med at opfylde deres funktion. I dette tilfælde taler de om udviklingen af antibiotikaresistens over for lægemidlet. Og punktet her er slet ikke effektiviteten af det aktive stof i AMP, men i mekanismerne til forbedring af patogene mikroorganismer, hvorigennem bakterier ikke bliver følsomme for antibiotika designet til at bekæmpe dem.

Så antibiotikaresistens er intet andet end et fald i bakteriens modtagelighed overfor antimikrobielle lægemidler, der blev skabt for at ødelægge dem. Det er derfor, at behandling synes at være korrekt udvalgt, giver forberedelserne ikke de forventede resultater.

[1], [2], [3], [4], [5], [6],

Problemet med antibiotikaresistens

Manglen på antibiotikabehandling i forbindelse med antibiotikaresistens fører til, at sygdommen fortsætter med at udvikle sig og bliver til en tungere form, hvis behandling bliver endnu vanskeligere. Særligt farlige er tilfælde, hvor en bakteriel infektion påvirker vitale organer: hjertet, lungerne, hjernen, nyrerne mv. Fordi i dette tilfælde forsinkelsen i døden er ens.

Den anden fare er, at nogle sygdomme med kronisk antibiotikabehandling kan blive kroniske. En person bliver bærer af forbedrede mikroorganismer resistente over for antibiotika i en bestemt gruppe. Han er nu kilden til infektion, for at bekæmpe, hvilke gamle metoder bliver meningsløse.

Alt dette skubber farmaceutisk videnskab til opfindelsen af nye, mere effektive midler med andre aktive stoffer. Men processen går igen med udviklingen af antibiotikaresistens mod nye lægemidler fra kategorien antimikrobielle midler.

Hvis nogen synes at tro, at problemet med antibiotikaresistens er opstået ret for nylig, er han meget forkert. Dette problem er gammelt som verden. Nå, måske ikke så meget, og alligevel er hun allerede 70-75 år gammel. Ifølge den almindeligt accepterede teori syntes det sammen med indførelsen af de første antibiotika i medicinsk praksis et eller andet sted i 40'erne af det 20. århundrede.

Selv om der er et begreb om et tidligere udseende af problemet med resistens af mikroorganismer. Før forekomsten af antibiotika blev dette problem ikke specifikt behandlet. Det er så naturligt, at bakterier som andre levende ting forsøgte at tilpasse sig ugunstige miljøforhold, gjorde det til deres egen måde.

Problemet med resistens af patogene bakterier tilbagekaldte sig selv, da de første antibiotika dukkede op. Men så var spørgsmålet ikke så vigtigt. På det tidspunkt, aktivt gennemførte udviklingen af forskellige grupper af antibiotika, som på nogle måder skyldtes ugunstige politiske situation i verden, krig, når soldater døde af sår og sepsis, bare fordi de ikke kunne yde effektiv bistand på grund af manglende medicin. Bare disse stoffer eksisterede ikke endnu.

Det største antal udviklinger blev gennemført i 50-60 år i det tyvende århundrede, og i løbet af de næste 2 årtier blev deres forbedring gennemført. Fremskridt på dette er ikke afsluttet, men siden 80'erne er udviklingen med hensyn til antibakterielle midler blevet markant mindre. Blame om til store omkostninger på virksomhedens (udvikling og produktion af et nyt produkt i vores tid kommer allerede til grænsen i USA 800 millioner $), eller simpel mangel på nye ideer til "militante" aktive stoffer til innovative lægemidler, men i forbindelse med problemet med antibiotikaresistens over til et nyt skræmmende niveau.

Samtidig med at udvikle lovende AMP'er og skabe nye grupper af sådanne stoffer, håbede forskerne at besejre flere typer bakterieinfektion. Men alt viste sig ikke at være så simpelt "tak" for antibiotikaresistens, som udvikler sig ganske hurtigt i individuelle bakteriestammer. Entusiasme er gradvist tørre op, men problemet forbliver uløst i lang tid.

Det er fortsat uklart, hvordan mikroorganismer kan udvikle resistens over for lægemidler, som i teorien skulle dræbe dem? Her er det nødvendigt at forstå, at bakteriernes "drab" kun forekommer, når stoffet anvendes til det tilsigtede formål. Og hvad har vi virkelig?

Årsager til antibiotikaresistens

Her kommer vi til det vigtigste spørgsmål om, hvem der har skylden, at bakterierne når de udsættes for antibakterielle midler ikke dø, og ligefrem degenererede ved at erhverve nye egenskaber, som ikke er i hænderne på menneskeheden? Hvad fremkalder sådanne ændringer, der opstår med mikroorganismer, der er årsagen til mange sygdomme, som menneskeheden har kæmpet i mere end et årti?

Det er klart, at den egentlige årsag til udvikling af antibiotikaresistens er levende organismers evne til at overleve under forskellige forhold og tilpasse sig dem på forskellige måder. Men evnen til at undvige et dødbringende projektil i ansigtet af et antibiotikum, som i teorien burde bære døden for dem, gør bakterierne ikke. Så hvordan viser det sig, at de ikke kun overlever, men også forbedrer sig med forbedringen af farmaceutiske teknologier?

Det skal forstås, at hvis der er et problem (i vores tilfælde udviklingen af antibiotikaresistens i patogene mikroorganismer), så er der provokerende faktorer, der skaber betingelser for det. Bare i denne sag forsøger vi nu at forstå.

[7], [8], [9], [10], [11],

Faktorer for udvikling af antibiotikaresistens

Når en person kommer til en læge med klager om hans helbred, forventer han kvalificeret hjælp fra en specialist. Hvis det kommer til en infektion i luftvejene eller andre bakterielle infektioner, er lægens opgave at ordinere et effektivt antibiotikum, der ikke vil lade sygdommen udvikle sig og bestemme den dosis, der er nødvendig for dette formål.

Valget af lægemidler hos lægen er stort nok, men hvordan man præcist bestemmer stoffet, der virkelig hjælper med at klare infektionen? På den ene side for at retfærdiggøre udnævnelsen af et antimikrobielt lægemiddel er det nødvendigt først at bestemme typen af patogen ifølge det etiotropiske koncept for lægemiddelvalg, der anses for at være den mest korrekte. Men på den anden side kan dette tage op til 3 eller flere dage, mens den vigtigste betingelse for vellykket helbredelse betragtes som rettidig behandling i de tidlige stadier af sygdommen.

Lægen har intet tilbage at gøre, efter at diagnosen blev foretaget, til at handle i de første dage tilfældigt, for på en eller anden måde at bremse sygdommen og forhindre, at den spredes til andre organer (en empirisk tilgang). Ved udnævnelse af en ambulant behandling går udøveren ud fra antagelsen om, at visse bakterier kan være årsagsmidlet til en bestemt sygdom. Dette er grunden til det indledende valg af lægemidlet. Formålet kan variere afhængigt af resultaterne af analysen for patogenet.

Og det er godt, hvis doktorens udnævnelse bekræftes af testresultaterne. Ellers vil ikke kun tiden gå tabt. Sagen er, at der for en vellykket behandling er en yderligere betingelse - fuldstændig deaktivering (i medicinsk terminologi findes der et begreb om "irradikation") af patogene mikroorganismer. Hvis dette ikke sker, bliver de overlevende mikrober simpelthen "syg", og de vil udvikle en slags immunitet mod det aktive stof i det antimikrobielle lægemiddel, der forårsagede deres "sygdom". Dette er lige så naturligt som produktionen af antistoffer i menneskekroppen.

Så hvis antibiotikummet er valgt korrekt, eller vil være ineffektiv doseringsregimen og dosis, patogene mikroorganismer ikke kan gå tabt, og mutere eller erhverve særlige for dem tidligere var muligt. Avl, sådanne bakterier danner hele populationer af stammer, der er resistente over for antibiotika i en bestemt gruppe, dvs. Antibiotikaresistente bakterier.

En anden faktor, der påvirker modtagelsen af patogene mikroorganismer mod antibakterielle lægemidler, er brugen af AMP i husdyrhold og veterinærmedicin. Anvendelsen af antibiotika i disse områder er ikke altid berettiget. Hertil kommer, at definitionen af sygdommen i de fleste tilfælde, patogenet ikke udføres eller udføres sent, fordi antibiotika behandler dybest set dyr i temmelig alvorlig tilstand, når det handler om tid og vente på testresultaterne er ikke mulig. Og i en landsby har en dyrlæge ikke altid denne mulighed, så han virker "blindt".

Men det ville ikke være noget, kun der er et andet stort problem - den menneskelige mentalitet, når alle er en læge til sig selv. Desuden forværrer udviklingen af informationsteknologi og muligheden for at købe de fleste antibiotika uden læge recept kun forværring af dette problem. Og hvis vi tager højde for, at vi har mere end ukvalificerede selvlærte læger end dem, der strengt følger lægenes forskrifter og henstillinger, får problemet en global dimension.

I vores land forværres situationen af, at de fleste mennesker forbliver økonomisk konkurs. De har ikke mulighed for at købe effektive, men dyre stoffer af en ny generation. I dette tilfælde erstatter de udnævnelsen af en læge med billigere gamle analoger eller stoffer, som den bedste ven eller alvidende ven rådede.

"Det hjalp mig og hjælper dig!" - Kan du argumentere med dette, hvis ordene lyder fra en nabos læber, der har mestret den rige livserfaring, som gik forbi krigen? Og få mennesker tror, at takket være sådanne vellæste og tillidsfulde patogene mikroorganismer har længe været tilpasset til at overleve under virkningen af lægemidler, der anbefales i tidligere tider. Og hvad hjalp bedstefar 50 år siden, kan vise sig at være ineffektivt i vores tid.

Og hvad kan vi sige om reklame og det uforklarlige ønske om nogle mennesker til at prøve innovationer på sig selv, så snart symptom-passende sygdom viser sig. Og hvorfor alle disse læger, hvis der er så vidunderlige stoffer, som vi lærer om fra aviser, tv-skærme og internetsider. Kun teksten om selvmedicinering er allerede blevet så kedelig, at få mennesker er opmærksomme på det nu. Og meget forgæves!

[12], [13], [14], [15], [16], [17], [18], [19], [20],

Mekanismer mod antibiotikaresistens

For nylig er antibiotikaresistens blevet det nummer et problem i den farmakologiske industri, der udvikler antimikrobielle stoffer. Sagen er, at den er iboende i næsten alle kendte sorter af bakterier, så antibiotikabehandling bliver mindre effektiv. Sådanne almindelige patogener som Staphylococci, Escherichia coli og Pseudomonas aeruginosa, proteinerne har resistente stammer, der er mere almindelige end deres forfædre udsat for antibiotika.

Modstand mod forskellige grupper af antibiotika, og selv til individuelle lægemidler, udvikler sig på forskellige måder. Gode gamle penicillin og tetracycliner, samt en ny udvikling i form af cefalosporiner og aminoglycosider er kendetegnet ved langsom udvikling af antibiotikaresistens, parallelt med disse falder, og deres terapeutiske virkning. Hvad der ikke kan siges om sådanne stoffer, hvis aktive stof er streptomycin, erythromycin, rifampicin og lincomycin. Modstanden mod disse stoffer udvikler sig i et hurtigt tempo, i forbindelse med hvilken udnævnelsen skal ændres selv under behandlingens løb uden at vente på opsigelsen. Det samme gælder for præparater af oleandomycin og fusidin.

Alt dette giver anledning til at antage, at mekanismerne for udvikling af antibiotikaresistens over for forskellige lægemidler er signifikant forskellige. Lad os prøve at forstå hvilke egenskaber bakterier (naturlige eller erhvervede) ikke tillader antibiotika at producere deres bestråling, som oprindeligt blev udtænkt.

Til at begynde med bestemmer vi, at modstanden af en bakterie kan være naturlig (beskyttende funktioner givet til den oprindeligt) og erhvervet, som vi diskuterede ovenfor. Indtil nu, er vi primært taler om den sande antibiotikaresistens, der er forbundet med funktionerne i mikroorganismen, snarere end den forkert valg eller udpegelse af lægemidlet (i dette tilfælde taler vi om falsk antibiotikaresistens).

Hvert levende væsen, herunder det enkleste, har sin egen unikke struktur og nogle egenskaber, der gør det muligt at overleve. Alt dette lægges genetisk og overføres fra generation til generation. Den naturlige modstandsdygtighed over for specifikke aktive stoffer af antibiotika er ligeledes nedfældet genetisk. Og i forskellige typer bakterier er resistens rettet mod en bestemt type lægemidler, og derfor er udviklingen af forskellige grupper af antibiotika, der påvirker en bestemt type bakterier, forbundet.

Faktorer, der forårsager naturlig modstand, kan være forskellige. For eksempel kan strukturen af proteinmembranen af en mikroorganisme være sådan, at et antibiotikum ikke kan klare det. Men antibiotika kan kun påvirkes af et proteinmolekyle, ødelægge det og forårsage en mikroorganismes død. Udviklingen af effektive antibiotika indebærer at tage hensyn til strukturen af proteinerne af bakterier mod hvilke lægemidlets virkning er rettet.

For eksempel skyldes antibiotikaresistensen af stafylokokker til aminoglycosider den kendsgerning, at sidstnævnte ikke kan trænge ind i den mikrobielle membran.

Hele overfladen af mikroben er dækket af receptorer, hvor visse typer er forbundet med AMP. Et lille antal egnede receptorer eller deres fuldstændige fravær fører til, at der ikke er nogen binding, og derfor er den antibakterielle virkning fraværende.

Blandt andre receptorer er der også dem, der for antibiotikumet tjener som en slags stråle, der signalerer placeringen af bakterierne. Fraværet af sådanne receptorer tillader mikroorganismen at skjule sig fra fare i form af AMP, hvilket er en slags forklædning.

Nogle mikroorganismer har en naturlig evne til aktivt at trække AMP fra cellen. Denne evne kaldes effluksom, og den karakteriserer resistensen af Pseudomonas aeruginosa mod carbapenemer.

Biokemisk mekanisme af antibiotikaresistens

Ud over de naturlige mekanismer for udvikling af antibiotikaresistens anført ovenfor er der en yderligere, der ikke er relateret til bakteriecellens struktur, men med dens funktionelle.

Faktum er, at der i bakterierne kan produceres enzymer, der kan have en negativ effekt på molekylerne af AMP's aktive stof og reducere dets effektivitet. Bakterier, når de interagerer med et sådant antibiotikum, lider også, deres virkning er markant svækket, hvilket skaber udseende af hærdende infektion. Ikke desto mindre forbliver patienten en bærer af bakteriel infektion i nogen tid efter den såkaldte "opsving".

I dette tilfælde handler vi om en modifikation af antibiotikumet, som følge heraf bliver det inaktivt med hensyn til denne type bakterier. Enzymer produceret af forskellige typer bakterier kan variere. Staphylococcus er karakteriseret ved syntesen af beta-lactamase, som fremkalder bruddet af lactemringen af antibiotika i penicillinserien. Udviklingen af acetyltransferase kan forklare resistensen over for chloramphenicol-gram-negative bakterier mv.

[21], [22], [23]

Erhvervet antibiotikaresistens

Bakterier, som andre organismer, er ikke fremmede for evolution. Som reaktion på "militære" handlinger imod dem kan mikroorganismer ændre deres struktur eller begynde at syntetisere så meget af et enzymstof, som ikke kun kan reducere lægemidlets effektivitet, men også ødelægge det fuldstændigt. For eksempel gør den aktive produktion af alanintransferase "Cycloserine" ineffektivt mod bakterier, som producerer det i store mængder.

Antibiotikaresistens kan også udvikle sig på grund af en modifikation i cellestrukturen af proteinet, hvilket også er dets receptor, hvortil AMP skal binde. Dvs. Denne type protein kan være fraværende i bakteriekromosomet eller ændre dets egenskaber, som følge af, at forbindelsen mellem bakterien og antibiotika bliver umulig. For eksempel forårsager tabet eller modifikationen af et penicillinbindende protein ufølsomhed over for penicilliner og cephalosporiner.

Som følge af udviklingen og aktiveringen af beskyttende funktioner i bakterier, som tidligere er modtagelige for den destruktive virkning af en bestemt type antibiotika, ændres cellemembranets permeabilitet. Dette kan gøres ved at reducere de kanaler, gennem hvilke AMP's aktive stoffer kan trænge ind i cellen. Det er disse egenskaber på grund af streptokokkernes ufølsomhed over for beta-lactam-antibiotika.

Antibiotika kan påvirke bakteriens cellulære metabolisme. Som reaktion herpå lærte nogle mikroorganismer at afstå fra kemiske reaktioner, som er påvirket af antibiotika, hvilket også er en separat mekanisme til udvikling af antibiotikaresistens, hvilket kræver konstant overvågning.

Nogle gange går bakterier til et bestemt trick. Ved at slutte sig til et tæt stof, er de forenet i samfund, der hedder biofilm. Inden for samfundet er de mindre følsomme for antibiotika og kan sikkert tolerere doser, der dræber for en enkelt bakterie, der lever uden for "kollektivet".

En anden mulighed er at kombinere mikroorganismer i grupper på overfladen af et halvflydende medium. Selv efter celledeling forbliver en del af den bakterielle "familie" inde i "gruppering", som ikke kan påvirkes af antibiotika.

[24], [25], [26], [27], [28], [29], [30]

Gen af antibiotikaresistens

Der er begreber af genetisk og ikke-genetisk resistens. Med sidstnævnte beskæftiger vi os med, når vi betragter bakterier med inaktiv metabolisme, som ikke er tilbøjelige til multiplikation under normale forhold. Sådanne bakterier kan udvikle antibiotikaresistens over for visse typer stoffer, men alligevel overføres denne evne ikke til deres afkom, da den ikke er genetisk inkorporeret.

Dette er karakteristisk for patogene mikroorganismer, der forårsager tuberkulose. En person kan blive smittet og ikke mistanke om sygdommen i mange år, indtil hans immunitet af en eller anden grund ikke vil mislykkes. Dette er udløseren til multiplikation af mykobakterier og sygdommens progression. Men alle de samme stoffer bruges til at behandle tuberkulose, den bakterielle afkom er stadig følsom over for dem.

Det samme er tilfældet med tabet af protein i mikroorganismernes cellevæg. Husk igen om bakterier, der er følsomme for penicillin. Penicilliner hæmmer syntesen af proteinet, som tjener til at opbygge cellemembranen. Under påvirkning af AMP penicillin serier kan mikroorganismer miste cellevæggen, hvis byggemateriale er det penicillinbindende protein. Sådanne bakterier bliver resistente over for penicilliner og cephalosporiner, som nu ikke har noget at kommunikere med. Dette fænomen er midlertidigt, ikke relateret til mutationen af gener og overførslen af det muterede gen ved arv. Med udseendet af cellevæggen, som er karakteristisk for tidligere populationer, forsvinder antibiotikaresistensen i sådanne bakterier.

Den genetiske antibiotikaresistens siges at forekomme, når ændringer i cellerne og metabolisme inden for dem forekommer på genniveau. Mutationer af gener kan forårsage ændringer i cellemembranets struktur, fremkalde produktion af enzymer, der beskytter bakterier mod antibiotika, og ændrer også antallet og egenskaberne af bakteriecellens receptorer.

Der er 2 måder at udvikle begivenheder: kromosomale og ekstrakromosomale. Hvis der opstår en genmutation på den del af kromosomet, som er ansvarlig for følsomheden overfor antibiotika, taler de om kromosomal antibiotikaresistens. I sig selv forekommer en sådan mutation ekstremt sjældent, det forårsager normalt virkningerne af stoffer, men igen, ikke altid. Det er meget svært at kontrollere denne proces.

Kromosomale mutationer kan overføres fra generation til generation, hvilket gradvist danner bestemte stammer (sorter) af bakterier, der er resistente over for et eller andet antibiotikum.

Culprits af ekstrachromosomal resistens overfor antibiotika er genetiske elementer, som eksisterer uden for kromosomerne og kaldes plasmider. Det er disse elementer, der indeholder de gener, som er ansvarlige for enzymmængden og bakterievæggenes permeabilitet.

Antibiotikaresistens er oftest resultatet af vandret genoverførsel, når nogle bakterier overfører nogle gener til andre, der ikke er deres efterkommere. Men nogle gange ikke-forbundne punktmutationer kan observeres i patogenets genom (størrelse 1 i 108 for en proces til kopiering af DNA fra modercellen, som observeres ved replikering af kromosomer).

Så i efteråret 2015 beskrev forskere fra Kina genet MCR-1, der blev fundet i svinekød og svintarme. Et træk ved dette gen er muligheden for overførsel til andre organismer. Efter et stykke tid blev det samme gen fundet ikke kun i Kina, men også i andre lande (USA, England, Malaysia, Europæiske lande).

Antibiotikaresistensgenene er i stand til at stimulere produktionen af enzymer, der ikke tidligere var produceret i bakterienes krop. For eksempel findes enzymet NDM-1 (metal beta-lactamase 1), der findes i bakterier Klebsiella pneumoniae i 2008. I første omgang blev det fundet i bakterier fra Indien. Men i de efterfølgende år blev et enzym, der tilvejebringer antibiotikaresistens mod de fleste AMP, påvist i mikroorganismer i andre lande (Storbritannien, Pakistan, USA, Japan, Canada).

Patogene mikroorganismer kan være resistente over for visse lægemidler eller grupper af antibiotika, såvel som til forskellige grupper af stoffer. Der er sådan en ting som kryds-antibiotikaresistens, når mikroorganismer bliver ufølsomme over for lægemidler med en lignende kemisk struktur eller virkningsmekanisme på bakterier.

Antibiotikaresistens af stafylokokker

Staphylococcal infektion betragtes som en af de mest almindelige blandt samfundsmæssige infektioner. Men selv i et hospital på overfladerne af forskellige genstande er det muligt at opdage omkring 45 forskellige stammer af stafylokokker. Dette tyder på, at bekæmpelsen af denne infektion er næsten sundhedspersonalets første prioritet.

Vanskeligheden ved denne opgave er, at de fleste stammer af de patogene stafylokokker Staphylococcus epidermidis og Staphylococcus aureus er resistente over for mange typer af antibiotika. Og antallet af sådanne stammer vokser hvert år.

Staphylococcers evne til multiple genetiske mutationer afhængigt af habitatbetingelserne gør dem næsten uskadelige. Mutationer overføres til efterkommere, og på kort tid er der hele generationer infektiøse midler resistente mod antimikrobielle præparater fra slægten Staphylococci.

Det største problem - det er methicillinresistente stammer, som er resistente ikke blot at betalactamer (β-lactam-antibiotika: visse undergrupper af penicilliner, cephalosporiner, carbapenemer og monobactamer), men også andre former for ILA: tetracykliner, makrolider, lincosamider aminoglycosider, fluorquinoloner, chloramphenicol.

I lang tid kan infektionen kun ødelægges ved hjælp af glycopeptider. I øjeblikket løses problemet med antibiotikaresistens af sådanne stammer af stafylokokker ved hjælp af en ny type AMP-oxazolidinoner, hvis lyse repræsentant er linezolid.

[31], [32], [33], [34], [35], [36], [37], [38]

Metoder til bestemmelse af antibiotikaresistens

Når man opretter nye antibakterielle lægemidler, er det meget vigtigt at definere sine egenskaber klart: hvordan de virker og hvilke bakterier der er effektive. Dette kan kun bestemmes gennem laboratorieforskning.

Analyse for antibiotikaresistens kan udføres ved hjælp af forskellige metoder, hvoraf de mest populære er:

• Disc metode eller diffusion af AMP i agar ifølge Kirby-Bayer
• Fremgangsmåde til serielle fortyndinger
• Genetisk identifikation af mutationer, der forårsager lægemiddelresistens.

Den første metode til dato betragtes som den mest almindelige på grund af billighed og enkelthed ved udførelse. Essensen af skivemetoden er, at stammerne fra bakterier isoleret som følge af forskning placeres i et næringsmedium af tilstrækkelig tæthed og dækket med imprægneret AMP-opløsning med papirskiver. Koncentrationen af antibiotika på skiverne er forskellig, så når lægemidlet diffunderer ind i bakteriemediet, kan en koncentrationsgradient observeres. Af størrelsen af zonen for ikke-vækst af mikroorganismer kan man bedømme præparatets aktivitet og beregne den effektive dosering.

En variant af diskmetoden er E-testen. I dette tilfælde anvendes polymerer i stedet for skiver, på hvilke en vis koncentration af antibiotika anvendes.

Ulemperne ved disse metoder er unøjagtigheden af beregningerne forbundet med afhængigheden af koncentrationsgradienten på forskellige betingelser (massefylde af medium, temperatur, surhed, calcium og magnesiumindhold osv.).

Metoden til seriefortyndinger er baseret på dannelsen af flere varianter af et flydende eller tæt medium indeholdende forskellige koncentrationer af testpræparatet. Hver af varianterne befolkes med en vis mængde af det bakterielle materiale, der undersøges. Ved inkubationstiden er væksten af bakterier eller dets fravær anslået. Denne metode giver dig mulighed for at bestemme den minimale effektive dosis af lægemidlet.

Metoden kan forenkles ved kun at tage 2 medier, hvis koncentration vil være så tæt som muligt til det minimum, der er nødvendigt for at inaktivere bakterierne.

Seriefortyndingsmetoden anses med rette for guldstandarden til bestemmelse af antibiotikaresistens. Men på grund af den høje pris og arbejdskraft er den ikke altid anvendelig i den indenlandske farmakologi.

Fremgangsmåder til identifikation af mutationer giver oplysninger om tilstedeværelsen af en bestemt bakteriestamme muterede gener, der bidrager til udviklingen af antibiotikaresistens til specifikke lægemidler, og derfor opstår situationer systematisere baseret lighedsscorer fænotypiske manifestationer.

Denne metode skelnes af de høje omkostninger ved testsystemer til dens gennemførelse, men dens værdi til forudsigelse af genetiske mutationer i bakterier er ubestridelig.

Uanset hvor effektive ovennævnte metoder til antibiotikaresistensprøvning kan de ikke fuldt ud reflektere det billede, der udfolder sig i den levende krop. Og hvis vi også tager højde for det øjeblik, hvor hver enkelt organismes organisme er individuel, kan fordelingsprocesserne og metabolisme af lægemidler foregå forskelligt i den, det eksperimentelle billede er meget langt fra det virkelige.

Måder at overvinde antibiotikaresistens

Ligegyldigt hvor godt dette eller det pågældende stof er, men med den holdning til behandling, som vi har, kan man ikke udelukke det faktum, at følsomheden hos patogene mikroorganismer på et tidspunkt kan ændre sig. Oprettelsen af nye lægemidler med de samme aktive stoffer løser heller ikke problemet med antibiotikaresistens. Og for nye generationer af stoffer er mikroorganismernes følsomhed med hyppige uberettigede eller forkerte aftaler gradvist svækket.

Et gennembrud i denne henseende betragtes som opfindelsen af kombinerede præparater, som hedder beskyttet. Deres anvendelse er berettiget til bakterier, der producerer destruktiv enzymer til fælles antibiotika. Beskyttelse populære antibiotika foretaget af optagelsen af det nye lægemiddel med særlige midler (fx, enzyminhibitorer, der er farlige for en bestemt type ILA) er beskåret produktion af disse enzymer forhindrer bakterier og eliminering af lægemidlet fra cellen via en membranpumpe.

Som hæmmere af beta-lactamaser er det sædvanligt at anvende clavulansyre eller sulbactam. De tilsættes i beta-lactam antibiotika, hvilket øger effektiviteten af sidstnævnte.

I øjeblikket udviklingen af stoffer, der kan påvirke ikke kun de enkelte bakterier, men også de, der har slået sammen i grupper. Bekæmpelsen af bakterier i biofilmen kan kun udføres efter ødelæggelsen og frigivelsen af organismer, som tidligere var forbundet med kemiske signaler. Med hensyn til muligheden for ødelæggelse af biofilm overvejer forskere en sådan form for stoffer som bakteriofager.

Kamp mod andre bakterielle "grupperinger" udføres ved at overføre dem til et flydende medium, hvor mikroorganismer begynder at eksistere hver for sig, og nu kan de bekæmpes med konventionelle lægemidler.

I modsætning til fænomenet resistens i behandlingen af lægemiddelbehandling løser lægerne problemet med at ordinere forskellige lægemidler, der er effektive mod de isolerede bakterier, men med forskellige virkningsmekanismer på den patogene mikroflora. For eksempel skal du samtidig bruge stoffer med bakteriedræbende og bakteriostatisk virkning eller erstatte et lægemiddel med en anden fra en anden gruppe.

Forebyggelse af antibiotikaresistens

Den vigtigste opgave med antibiotikabehandling er den fuldstændige ødelæggelse af populationen af patogene bakterier i kroppen. Denne opgave kan kun løses ved udnævnelsen af effektive antimikrobielle midler.

Virkningsfuldhed bestemmes ifølge dens spektrum af aktivitet (enten inkluderet i dette interval identificeret patogen) kapacitet til at overvinde antibiotikaresistens mekanismer, optimalt valgt doseringsplan, hvorunder der er ødelæggelse af patogene mikroflora. Derudover skal sandsynligheden for at udvikle bivirkninger og tilgængeligheden af behandling for hver enkelt patient overvejes ved tilskrivning af et lægemiddel.

Med en empirisk tilgang til terapi af bakterielle infektioner er det ikke muligt at tage hensyn til alle disse punkter. Det kræver en høj professionalisme hos lægen og konstant overvågning af informationer om infektioner og effektive stoffer til bekæmpelse af dem, således at udnævnelsen ikke var uberettiget og ikke førte til udvikling af antibiotikaresistens.

Oprettelsen af højteknologiske lægecentre gør det muligt at udøve etiotropisk behandling, når patogenet først detekteres på kortere tid, og derefter administreres et effektivt lægemiddel.

Forebyggelse af antibiotikaresistens kan også betragtes som kontrol med ordination. For eksempel i ARVI er udnævnelsen af antibiotika ikke berettiget, men det bidrager til udviklingen af antibiotikaresistens af mikroorganismer, der i øjeblikket er i en "sovende" tilstand. Det faktum, at antibiotika kan fremkalde en svækkelse af immuniteten, hvilket igen vil medføre reproduktion af en bakteriel infektion, der er begravet inde i kroppen eller ind i den udefra.

Det er meget vigtigt, at de foreskrevne lægemidler opfylder målet om at blive opnået. Selv et lægemiddel ordineret til profylaktiske formål bør have alle de egenskaber, der er nødvendige for at ødelægge den patogene mikroflora. Valget af stoffet tilfældigt kan ikke kun give den forventede virkning, men forværre også situationen ved at udvikle modstand mod fremstilling af en bestemt type bakterier.

Der bør lægges særlig vægt på dosering. Små doser, ineffektive til bekæmpelse af infektion, leder igen til dannelsen af antibiotikaresistens i patogener. Men der er heller ikke behov for at overdrive det, for med antibiotikabehandling er sandsynligheden for at udvikle toksiske virkninger og anafylaktiske reaktioner, der er farlige for patientens liv, stor. Især hvis behandlingen udføres på ambulant basis uden kontrol fra det medicinske personale.

Gennem medierne er det nødvendigt at formidle for mennesker risikoen for selvmedicinering med antibiotika samt ufærdig behandling, når bakterier ikke dør, men kun bliver mindre aktive med den udviklede antibiotikaresistensmekanisme. Den samme virkning er også tilvejebragt af billige, ulicenserede lægemidler, at ulovlige lægemiddelvirksomheder udgør budgetmæssige modstykker af allerede eksisterende stoffer.

Høj grad af forebyggelse af antibiotikaresistens anses for at være en konstant overvågning af eksisterende smitstoffer og udviklingen af deres antibiotikaresistens ikke kun på niveau med distrikt eller region, men også på landsplan (og endda i hele verden). Ak, dette har kun at drømme.

I Ukraine findes der ikke infektionsbekæmpelsessystem som sådan. Der er kun vedtaget visse bestemmelser, hvoraf den ene (stadig i 2007!), Vedrørende obstetriske hospitaler, indebærer indførelse af forskellige metoder til overvågning af nosokomielle infektioner. Men alting hviler igen på økonomi, og på jorden er sådanne undersøgelser for det meste ikke gennemført, for ikke at nævne læger fra andre brancher af medicin.

I Den Russiske Føderation på problemet med antibiotikaresistens behandlet med mere ansvar, og bevis på dette er projektet "Kort af antimikrobiel resistens i Rusland." Forskning på dette område, indsamling af oplysninger og dens systematisering for antibiotika kortindhold involveret så store organisationer som Forskningsinstitut Antimikrobiel kemoterapi, mellemregionale associering for Mikrobiologi og antimikrobiel kemoterapi samt videnskabelig og metodisk antibiotikaresistens overvågningscenter oprettet på initiativ af den føderale agentur for Health Care og social udvikling.

Oplysninger, der leveres inden for rammerne af projektet, opdateres løbende og er tilgængelig for alle brugere, der har brug for information om antibiotikaresistens og effektiv behandling af infektionssygdomme.

At forstå, hvor relevant spørgsmålet om at reducere følsomheden hos patogene mikroorganismer og finde en løsning på dette problem i dag kommer gradvist. Men dette er allerede det første skridt i vejen for en effektiv kamp mod et problem kaldet "antibiotikaresistens". Og dette trin er ekstremt vigtigt.