Medicinsk ekspert af artiklen
Nye publikationer
Polymerasekædereaktion (PCR) til diagnosticering af infektionssygdomme
Sidst revideret: 05.07.2025
Alt iLive-indhold gennemgås medie eller kontrolleres for at sikre så meget faktuel nøjagtighed som muligt.
Vi har strenge sourcing retningslinjer og kun link til velrenommerede medie websteder, akademiske forskningsinstitutioner og, når det er muligt, medicinsk peer reviewed undersøgelser. Bemærk at tallene inden for parentes ([1], [2] osv.) Er klikbare links til disse undersøgelser.
Hvis du mener, at noget af vores indhold er unøjagtigt, forældet eller på anden måde tvivlsomt, skal du vælge det og trykke på Ctrl + Enter.
PCR er en af de DNA-diagnostiske metoder, der gør det muligt at øge antallet af kopier af den detekterede del af genomet (DNA) hos bakterier eller vira med millioner af gange ved hjælp af enzymet DNA-polymerase. Den testede del af nukleinsyren, der er specifik for et givet genom, multipliceres (amplificeres) mange gange, hvilket gør det muligt at identificere den. Først opdeles DNA-molekylet fra bakterier eller vira i to kæder ved opvarmning, derefter binder de sig til komplementære sektioner af DNA i nærvær af syntetiserede DNA-primere (nukleotidsekvensen er specifik for det genom, der bestemmes), og den anden kæde af nukleinsyre syntetiseres efter hver primer i nærvær af termostabil DNA-polymerase. Der opnås to DNA-molekyler. Processen gentages mange gange. Et DNA-molekyle, dvs. én bakterie- eller viruspartikel, er tilstrækkeligt til diagnostik. Indførelsen af et yderligere trin i reaktionen - DNA-syntese på et RNA-molekyle ved hjælp af enzymet revers transkriptase - gjorde det muligt at teste RNA-vira, såsom HCV-virus. PCR er en tretrinsproces, der gentages cyklisk: denaturering, primerannealing, DNA-syntese (polymerisering). Den syntetiserede mængde DNA identificeres ved ELISA eller elektroforese.
PCR kan bruge forskellige biologiske materialer - blodserum eller plasma, urethraskrabning, biopsi, pleuravæske, cerebrospinalvæske osv. PCR bruges primært til at diagnosticere infektionssygdomme såsom viral hepatitis B, viral hepatitis C, viral hepatitis D, CMV-infektion, seksuelt overførte infektioner (gonoré, klamydia, mycoplasma, ureaplasma-infektioner), tuberkulose, HIV-infektion osv.
Fordelen ved PCR til diagnosticering af infektionssygdomme i forhold til andre forskningsmetoder er som følger:
- det infektiøse agens kan detekteres i ethvert biologisk miljø i kroppen, herunder materiale indsamlet under en biopsi;
- det er muligt at diagnosticere infektionssygdomme i de tidligste stadier af sygdommen;
- det er muligt at kvantitativt evaluere forskningsresultaterne (hvor mange vira eller bakterier der findes i det undersøgte materiale);
- Metodens høje følsomhed; for eksempel er PCR's følsomhed til påvisning af hepatitis B-virus-DNA i blod 0,001 pg/ml (ca. 4×102 kopier /ml), mens følsomheden af DNA-hybridiseringsmetoden med forgrenede prober er 2,1 pg/ml (ca. 7×105 kopier /ml).
[