Medicinsk ekspert af artiklen
Nye publikationer
Polymerasekædereaktion (PCR) ved diagnosen infektionssygdomme
Sidst revideret: 23.04.2024
Alt iLive-indhold gennemgås medie eller kontrolleres for at sikre så meget faktuel nøjagtighed som muligt.
Vi har strenge sourcing retningslinjer og kun link til velrenommerede medie websteder, akademiske forskningsinstitutioner og, når det er muligt, medicinsk peer reviewed undersøgelser. Bemærk at tallene inden for parentes ([1], [2] osv.) Er klikbare links til disse undersøgelser.
Hvis du mener, at noget af vores indhold er unøjagtigt, forældet eller på anden måde tvivlsomt, skal du vælge det og trykke på Ctrl + Enter.
PCR - en af fremgangsmåderne til DNA-diagnostik gør det muligt at øge antallet af kopier af en detekterbar del af genomet (DNA) af bakterier eller vira er en million gange ved anvendelse af en DNA-polymerase-enzym. En test for denne specifikke genomiske nukleinsyresegment gentagne gange multipliceret (amplificeret), der tillader dets identifikation. Først et DNA-molekyle af bakterier eller vira ved opvarmning opdelt i to kæder, og derefter i nærvær af de syntetiserede DNA-primere (sekvens af nukleotider specifikke for det definerede genomiske) binder dem med komplementære strækninger af DNA, syntetiseret den anden streng af nukleinsyren efter hver primer i nærværelse af en varmestabil DNA-polymerase . To DNA-molekyler opnås. Processen gentages mange gange. Til diagnose er et molekyle DNA, det vil sige en bakterie eller en viral partikel, tilstrækkelig. Omsætning af et yderligere trin - DNA-syntese på RNA-molekylet ved anvendelse af enzymet revers transkriptase - har lov til at teste RNA-vira såsom HCV virus. PCR er en tre-trins proces, gentaget cyklisk: denaturering, primerglødning, DNA-syntese (polymerisering). Den syntetiserede mængde DNA er identificeret ved ELISA eller ved elektroforese.
PCR kan anvendes i forskellige biologisk materiale - serum eller blodplasma, skrabning af urinrøret, biopsi, pleuravæske, cerebrospinalvæske, etc. Den første PCR blev anvendt til diagnosticering af infektionssygdomme, såsom viral hepatitis B, hepatitis C, hepatitis D, CMV-infektion, infektiøs seksuelt overførte infektioner (gonorré, trash diynaya, mycoplasma, ureaplasma infektion), tuberkulose, HIV -infektion mv
Fordelen ved PCR ved diagnosticering af infektionssygdomme over andre forskningsmetoder er som følger:
- infektions forårsagende middel kan findes i ethvert biologisk miljø i kroppen, herunder materialet opnået ved biopsi;
- Det er muligt at diagnosticere smitsomme sygdomme i de tidligste stadier af sygdommen;
- En kvantitativ evaluering af resultaterne af forskningen er mulig (hvor mange virus eller bakterier er indeholdt i det undersøgte materiale);
- høj følsomhed af metoden fx følsomhed PCR til påvisning af DNA af hepatitis B virus i blodet er 0,001 pg / ml (ca. 4 x 10 2 kopier / ml), hvorimod følsomheden af en DNA-hybridisering fremgangsmåde under anvendelse af forgrenede prober - 2,1 pg / ml (ca. 7 × 10 5 kopier / ml).
[