Immunhistokemiske markører til diagnosticering af præcancerøse læsioner i mundslimhinden og rød kant på læberne

Tidlig og effektiv diagnose af neoplastiske læsioner af mundslimhinden (CRS) og rødlæbefælgen (CCG) forbliver et alvorligt problem med oncostomatologi. Klinisk cellekarcinom i mundhulen optager det sjette sted i verden i frekvens blandt maligne tumorer af alle lokaliseringer. I Den Russiske Føderation er forekomsten af maligne neoplasmer i mundhulen 2-4% af det totale antal maligne tumorer hos mennesker.

I de senere år har strukturen af sygdomme i mundslimhinden været genstand for betydelige ændringer, især en forøgelse af andelen af prækanceriske sygdomme. I den henseende forbliver den effektive, ikke-invasive påvisning af tegn på malignitet en akut opgave med tandpleje.

Trods den tilsyneladende enkelhed af klinisk billeddannelse indikator for ændringer i mundslimhinde og CGC i forbindelse med ekstern lokalisering, bestemmelse nosologiske præcancer, kun baseret på indtryk ved inspektion og palpering, ofte føre til diagnostiske fejl er blevet varierende grader af keratinisering eller ulceration endda markornyh elementer nederlag gør dem trudnodifferentsiruemymi. Specielt svært tidlig diagnose af malignitet, da de kliniske symptomer viser lidt senere faktisk forekom malign transformation.

Således er forskningen fra V.P. Kharchenko et al. Det er vist, at mere end 2/3 af patienterne på behandlingstidspunktet i den medicinske institution og diagnosticeringen har III-IV stadier af sygdommen. En af årsagerne til den sene behandling er "sløring" af det kliniske billede i de indledende stadier af sygdommen. Desuden er det nødvendigt at bevise behovet for at gennemføre organisatorisk og metodologisk arbejde og øge niveauet af viden om tandlæger om de tidlige kliniske manifestationer af precancerøse sygdomme i mundslimhinden. De udførte tests viste, at kun 42,8% af tandlægerne differentierer de tidlige manifestationer af oral cancer, 4,2% af respondenterne kan korrekt udføre primære diagnostiske foranstaltninger til påvisning af kræft ved denne lokalisering.

Procentdelen af uhelbredelige former for kræft i mundslimhinden skyldes diagnostiske fejl, ifølge forskellige forfattere, når 58,4-70%. Situationen er kompliceret af de uløste problemer med klinisk diagnose af forkalkningsmidler, især vanskeligheden ved at differentiere malignitetens indtræden samt problemet med at vælge en metode til behandling af en før-tumorsygdom. Der er ingen absolutte og relative indikationer for biopsi, især i de stadier af konservativ behandling. Hidtil er der ikke et eneste eksempel i litteraturen om det diagnostiske kriterium for det kliniske niveau, som en tandlæge kan henvise til, når man vælger en passende metode til behandling af en bestemt førtumorsygdom.

Opløsning af diagnostiske vanskeligheder de fleste forfattere ser i hjælpediagnostiske metoder (cytologi, cheilostomatoskopi, biomikroskopi, optisk kohærensomografi). Disse metoder er imidlertid temmelig subjektive, da de kun bærer den beskrivende karakter af kvalitative ændringer i de berørte væv. En måde at kvantificere morfologiske ændringer på er at bestemme immunhistokemiske markører.

Indførelsen i moderne praksis af moderne morfologiske metoder til tumorbekræftelse har signifikant forbedret kvaliteten af diagnose og behandling af maligne tumorer. Metodologiske muligheder for moderne molekylær onkologi udvidet øjeblikket bruger immunhistokemiske undersøgelser kan bestemme ikke kun den histologiske diagnose af tumoren, men også at give det morphofunctional egenskaber i form af aggressivitet og prognose i forhold til forstadier til kræft og kræft har allerede udviklet.

Ifølge moderne ideer er basisen for ondartet transformation af celler aktiveringen af enkelt- eller multipelcellulære onkogener eller suppressorgener. Det observeres hos 30% af kræftcancer hos mennesker og kan i mange tilfælde detekteres immunohistokemisk. Oncogenes ras p21, HER2 / neu, bcl-2 og suppressorgener p53 og Rb i forskellige tumorer er blevet undersøgt. Nogle af de listede onkogener (og suppressorgener) er uafhængige prognostiske og prædiktive tegn.

Epitelet af den mundtlige slimhinder er locuspredifektionen af dannelsen af kræfttumorer. Eksterne faktorer (traumatiske okklusion sites, de skarpe kanter af restaureringer insolvent ortopædisk design, irrationel individuel mundtlig hygiejne, inflammatoriske og destruktive parodontale læsioner), kan sammen med genetiske (arvelige) faktorer spiller en rolle i at forårsage kræft i denne lokalisering. Ved udviklingen af pladecellecarcinom i mundslimhinden skade kan være involveret i mekanismerne i kontrolprocesser epitelhyperplasi og squamøs metaplasi.

Morfologiske træk af mundslimhinden epitel under malignitet forbundet med en ændring i et sæt af differentiering (fænotype cytokeratin primært epitellaget) markører CEA-ekspression samt proliferationsmarkør Ki - 67.

P53 er et tumor suppressor gen, hvis proteinprodukt er en nukleær transkriptionsfaktor med mange funktioner, herunder blokering af passage af celler gennem cellecyklussen og induktion af apoptose. P53 proteinet udtrykkes i alle celler i kroppen. I fravær af skade på det genetiske apparat er p53 proteinet i en inaktiv tilstand, og når DNA-beskadigelse opstår, aktiveres DNA'et. Aktivering består i at erhverve evnen til at binde til DNA og aktivere transkription af gener, der indeholder en nukleotidsekvens i regulatorisk region, hvilket betegnes ved p53-responselementet. Mutation af p53 i celler forekommende ca. 50% af cancere, fører til proteinsyntese med tabet af sine funktioner, men har en høj stabilitet og akkumulere i kernen at immunhistokemisk udtrykkes i en distinkt kernefarvning.

Den "vilde" type af wt-53-onkosuppressorgenet og p53-proteinet kodet af det spiller en central rolle i udviklingen af apoptose. Når DNA er beskadiget, forekommer ekspression af wt53-genet og det tilsvarende protein. Sidstnævnte blokerer cellecyklussen i G1-S-fasen og derved hæmmer yderligere replikation af det beskadigede DNA, der syntetiseres i S-fasen, og skaber betingelser for fjernelse af det beskadigede sted og reparation af dets ændrede sted. Hvis reparation opstår, fortsætter cellen med at opdele og give generering af sunde celler. Hvis der imidlertid ikke sker reparation, indgår der andre mekanismer, som sikrer destruktion af en sådan celle med beskadiget (mutagent) DNA, dvs. Det genetiske program for celledød udvikler sig - apoptose.
I de senere år er det blevet foreslået, at p53-status kan være en afgørende faktor, der bestemmer en følsomhed for en tumor til kemo- og strålebehandling. Bekræftelse af denne antagelse er talrige undersøgelser, der viser, at muteret p53 er en faktor med dårlig prognose og ineffektivitet af adjuvansbehandling for forskellige neoplasmer i mundslimhinden.

Markører for proliferation er også en meget informativ diagnostisk værdi ved forudsigelse af maligne tumors forløb. Proliferativ aktivitet er en ledende faktor både i mekanismen for malign transformation af celler og i den biologiske opførsel af allerede fremvoksende tumorer. En lovende markør for proliferativ aktivitet er Ki-67 antigenet, som udtrykkes praktisk taget i alle faser af cellecyklussen og afspejler følgelig størrelsen af den proliferative pool. Genet, som koder for Ki-67, er placeret på den lange arm af 10-kromosomet. Ki-67 refererer til regulatoriske proteiner. Dets udseende falder sammen med indtræden af cellen i mitose, hvilket gør det muligt at anvende det som en universel markør for proliferation ved evaluering af væksten af maligne tumorer.

Der er udført en række undersøgelser, der undersøger diagnosticeringsværdien af immunohistokemiske markører ved forudsigelse af forløbet af precancerøse læsioner af mundslimhinden og den røde kant af læberne. Murti PR et al. Studerede ekspressionen af p53 med rød flat-rate SSRI. Når den immunohistokemiske metode blev bestemt, kunne ekspression af p53 ikke afsløre den maligne status af forkalkeren af den orale slimhinde. Forfatterne foreslog, at toppen af overekspression af p53 er tæt på tidspunktet for forvandling af forkalkeren til kræft, og kan ikke anvendes som en tidlig markør til forudsigelse af maligniteten af forkalkeren af mundslimhinden. Andre forskere fandt ud af, at det humane gen TP53 koder for mindst 9 forskellige isoformer. Et andet medlem af p53-familien, p63, indeholder 6 forskellige isoformer og spiller en central rolle i udviklingen af mundslimhinden, spytkirtler, tænder og hud. Det blev foreslået, at p63 er forbundet med udviklingen af pladecellecarcinom i hoved og nakke. Der blev imidlertid ikke observeret statistisk signifikante ændringer i ekspressionen af nye isoformer af p53 og p63 i precancer af SSRI i sammenligning med umodificeret væv. Undersøgelser af De Sousa FA bekræftede den prognostiske betydning af p53-markøren til bestemmelse af muligheden for malign transformation af forkalkeren af mundslimhinden. Samtidig mener nogle forfattere, at p53 ikke kan bruges som en enkelt markør til forudsigelse af udviklingen af kræft.

Lige så lovende prognostisk immunhistokemisk detektion plan er repræsenteret i den undersøgte vævsprøver podoplanina - integral membran mucoprotein udtrykt som uændret og den ændrede inflammatoriske og neoplastiske endotel af lymfatiske kapillærer. Forskere havde fundet en statistisk signifikant sammenhæng ekspression podoplanina iABCG2 (ATP-bindende protein undergruppe G2) med risiko for malign transformation af lichen planus (risikoen var signifikant højere med coekspression podoplanina og ABCG2, end uden coekspression podoplanina og ABCG2) og konkluderede, at podoplanin og ABCG2 kan anvendes som biomarkører for vurdering af risikoen for malign transformation med præcancerøse læsioner RBCU

Forskninger fra udenlandske forskere bekræftede den diagnostiske betydning af Fas / FasL-udtryk som biomarkører af kræftudvikling. Fas er et type I-transmembranprotein glycoprotein (synonymer APO-I, CD95), og inducerer apoptose i celler efter interaktion med Fas-ligand (FasL) eller agonistisk monoklonalt antistof mod Fas.

På samme tid er det kendt, at Fas er udtrykt i stort set alle typer væv. Forøget Fas-ekspression observeres i nyrerne, leveren, hjertet og tymus. Derudover udtrykkes denne receptor på mange tumorer såvel som virusinficerede celler. Årsagen til modstanden af forskellige celletyper til Fas-afhængig apoptose kan være øget produktion af opløselige Fas af disse celler. Opløseligt Fas er et produkt af alternativ splejsning og er i stand til at inhibere apoptose induceret af agonistiske monoklonale antistoffer mod Fas eller FasL.

Således, tvetydige fortolkning af resultaterne af undersøgelser foretaget af forskellige forfattere fører til den konklusion, at i det nuværende molekylær onkologi bruger immunhistokemisk markør fremadrettet i kombination med andre metoder til diagnose og prognose af præmaligne læsioner i mundslimhinden.

Af særlig relevans er problemet med at rangordne immunhistokemiske markører til diagnostisk betydning. Vi mener, at i orden af faldende betydning kan de arrangeres i følgende rækkefølge:

1. Immunohistokemiske markører med høj diagnostisk betydning: subplanin, ABCG2, bcl-2;
2. Immunohistokemiske markører med en gennemsnitlig grad af diagnostisk betydning: Bax, MMP-9;
3. Lovende immunhistokemiske markører, hvis diagnostiske betydning kræver yderligere undersøgelse: MMP-2, MT1-MMP, Fas / FasL;
4. Immunohistokemiske markører, hvis diagnostiske betydning for at forudsige forløbet af forstadierne er ikke bevist: p53, p63.

Baseret på denne analyse af litteratur data kan det konkluderes, at bestemmelsen af immunhistokemiske markører ikke bør betragtes som den eneste metode til at forudsige forløbet af præcancerøse læsioner af mundslimhinden og identificering af risikoen for malign transformation, men ikke desto mindre fremgangsmåden har en høj diagnostisk værdi i kombination med andre metoder til forudsigelse af sygdomsforløbet.

Seniorforsker Kuznetsova Roza Gilevna. Immunohistokemiske markører ved diagnose af precancerøse læsioner af mundhindehinden og den røde kant af læberne // Praktisk medicin. 8 (64) december 2012 / volumen 1

[1], [2], [3], [4], [5]