Hepatitis B -virus

Hepatitis B er en smitsom sygdom hos en person, der er karakteriseret ved selektiv skade på leveren af en virus. Denne form for hepatitis er den farligste i dens konsekvenser blandt alle kendte former for viral hepatitis. Dets årsagsmiddel er hepatitis B-viruset (HBV).

Første antigen af hepatitis B virus er blevet påvist B. Blumberg i 1964 i serum australsk aborigine, og patogenet blev fundet i 1970, D. Dane (et al.), Og fik navnet på Danepartikler, fordi der var ingen sikkerhed for, at , at dette virkelig er en virus, ikke dens komponenter. Derefter forsvandt alle tvivl, da der i dansk partiklerne blev fundet genomisk DNA og en viral DNA-afhængig DNA-polymerase. Virionen indeholder tre hovedantigener, for hvilke følgende betegnelser blev indført i 1974:

• HBsAg er et overfladisk eller opløseligt eller australsk antigen.
• HBcAg er et kerneantigen (co-antigen).
• HBeAg - e-antigen, er lokaliseret i kernen af virionet og i modsætning HBcAg, ikke blot er til stede i virionen, men også cirkulerer i blodet i en fri form eller som et kompleks med anti-HBeAg. Det udskilles i blodet fra hepatocytter med aktiv replikation af HBV.

Overfladeantigenet - HBsAg - findes i form af tre morfologisk forskellige varianter: 1) repræsenterer superkapsidet af hele virionen; 2) forekommer i store mængder i form af partikler med en diameter på 20 nm med en sfærisk form; 3) i form af filamenter med en længde på 230 nm. Kemisk er de identiske. Sammensætningen har en total HBsAg-antigen og to par af indbyrdes eksklusive typespecifikke determinanter: d / y og w / r, så der er fire store undertype HBsAg (og dermed HBV): adw, adr, ayw og aur. Antigen a tilvejebringer dannelsen af en fælles krydsimmunitet overfor alle undertyper af viruset.

Faktisk har virionen, Dain-partiklen en sfærisk form og en diameter på 42 nm. Virions supercapsid består af tre proteiner: hoved- (hoved), store og mellemstore. Genomet er indesluttet i et kapsid og er repræsenteret af et dobbeltstrenget ringformet DNA med en masse på 1,6 MD. DNA'et består af ca. 3200 nukleotider, men dets "plus" -non er 20-50% kortere end minustegnet. Med 5'-enden af det lange tråd er det virusspecifikke protein bundet kovalent. 5'-enderne af begge tråde er komplementære og danner "klæbrige" sekvenser 300 nukleotider i længden, således at filamenterne lukkes i ringen. Indholdet af G + C i virion-DNA er 48-49 mol%. I kernen af virionen er der foruden genomisk DNA-viral DNA-afhængig DNA-polymerase. Den "minus" -definerede DNA af HBV indeholder kun fire gener (S, C, P og X), men de er organiseret meget kompakt. Genererne S, C, P, X overlapper stærkt og styrer syntesen af de følgende produkter. Gene S koder for syntesen af hovedcoatingproteinet og indeholder al information om overfladeantigenet af HBsAg. Derudover koder den for syntesen af mellemstore og store kappeproteiner. Proteiner indeholder en fælles COOH-terminus, men deres oversættelse begynder med tre forskellige initiatorkodoner. Gene C koder for syntese af capsidproteiner (HBcAg og HBeAg); selvom disse proteiner er kodet af et enkelt gen, er måderne af deres oversættelse forskellige. Gene P er den største. Den indeholder en del af alle tre andre gener og koder for de enzymer, der er nødvendige for replikation af viruset. Specielt koder den for revers transkriptase, domænet af enzymet RNA-ase H, det 5'-terminale protein af "minus" -kæden. Gene X koder for proteiner, som regulerer ekspressionen (ekspression) af alle virale gener, især et protein med en masse på 17 kD, som er en gentransskriptionstransaktivator.

Proteiner, der danner et overfladeantigen, eksisterer i glycosyleret (gp) og ikke-glycosyleret form. Glycosylerede er gp27, gp33, gp36 og gp42 (tallene er angivet ved m i kD). Supercapsid HBV består af hoved- eller basisk S-protein (92%); gennemsnitligt M-protein (4%) og stort eller langt L-protein (1%).

• Hovedproteinet, p24 / gp27 eller hovedproteinet (protein S) er hovedkomponenten i HBV-konvolutten. I fravær af andre skalproteiner polymeriseres og dannes sfæriske partikler med en diameter på 20 nm, som består af 100 polypeptidmolekyler.
• Et stort protein, p39 / gp42 eller et langt protein (L protein) er til stede i alle tre former for HBsAg. Det spiller en vigtig rolle i morfogenese af virioner og i deres udgang fra cellen. L-proteinet indeholder en sekvens af protein M, som komplementeres ved N-terminalen med sekvenser på 108 (ayw) eller 119 (adw, adr, ayr) af aminosyrerester kodet af n-S-regionen i S-genet.
• Mellemproteinet - gp33 / gp36, eller proteinet M, er også til stede i alle tre morfologiske former af HBsAg. Proteinet M indeholder ved N-terminalen et område på 55 aminosyrerester kodet af S-genets før-52-region. Det antages, at dette websted spiller en vigtig rolle i anerkendelsen af hepatitis B-virus af leverceller i et begrænset værtsområde (human, chimpanseaben). Proteinsekvenserne kodet af S-gen npe-S-regionerne har høj immunogenicitet, og deres determinanter er placeret på overfladen af virionen. Derfor spiller antistoffer mod disse antigener en vigtig rolle i dannelsen af immunitet mod hepatitis B.

Syntese af virale proteiner styres tæt på niveauet for transkription og translation. Ved transkriptionen af virusgenomet syntetiseres to typer mRNA:

• en mindre - 2100 nukleotider - koder for membranets hoved- og middelproteiner;
• store - 3.500 nukleotider, dvs. Længere end selve genomisk DNA; den indeholder terminale gentagelser på 100 nukleotider i længden.

Denne type mRNA koder for capsidproteinet og produkterne af P-genet. Det er også en template til viral DNA-replikation. Som en del af genomet er der enhancers (transkriptionsforstærkere) - regulatoriske elementer, der aktiverer ekspressionen af alle virale gener og virker primært i levercellerne. Især udtrykkes gen S på et meget højt niveau kun i levercellerne og under påvirkning af steroidhormoner. Denne omstændighed forklarer, hvorfor kronisk hepatitis B og levercancer (hepatom) observeres hos mænd oftere end hos kvinder, der har et lavere niveau af steroidhormoner.

Andre regulatoriske elementer af hepatitis B-virus modulerer (kontrollerer) niveauerne af syntese af individuelle proteiner. For eksempel syntetiseres et stort protein kun i små mængder. Det meste af det på overfladen af infektiøse virioner. Og hovedproteinet og i mindre grad syntetiseres midterproteinet i store mængder og efterlader cellerne i overfladeantigenpartiklerne, som i serum indeholder mange gange mere end de modne virioner. Antallet af overfladeantigenpartikler kan være 1011-1013 pr. 1 ml blod (flere hundrede μg).

Hepatitis B virus er isoleret i en ny virusgruppe - Hepadnaviridae, slægten Orthohepadnavirus. Lignende hepadnavirus blev fundet hos forskellige dyr (jordproteiner, marmoter, chipmunks, Peking-ducks).

Reproduktion af hepadnavirus finder sted på en usædvanlig måde. Især forekommer replikationen af genomisk DNA gennem det mellemliggende link-RNA, dvs. Med mekanismen for revers transkription.

Livscyklusen for hepatitis B-viruset.

• Adsorption på cellen.
• Indtrængning i cellen via receptormedieret endocytose mekanisme (omkranset pit -> omkranset hætteglas -> lysosom -> nucleocapsid udgang og indgang af det virale genom i hepatocyt nucleus).
• Intracellulær reproduktion.

Under penetrationen i cellen forlænger den korte ("plus") DNA-kæde (kompletterer). I kernen syntetiserer den cellulære DNA-afhængige RNA-polymerase et RNA på 3.500 nukleotider (prægener) og mindre mRNA'er til syntese af virale proteiner. Derefter pakkes pregenet og viral DNA-polymerasen ind i et nyligt syntetiseret capsid, som overføres til cytoplasmaet. Her forekommer revers-transkriptionen af prægenomet. Det syntetiserer et nyt "minus" -defineret DNA. Efter at syntesen af minus-DNA er afsluttet, ødelægges det pregenomiske RNA. Virion-DNA-polymerasen på "minus" -kæden syntetiserer et "plus" -kæde. Viral DNA, der nu er dobbeltstrenget, kan eksistere i cellen i ganske lang tid og vende tilbage til kernen til den næste replikationscyklus. Hvis den nye viruspartikel ikke udsættes for yderligere replikation, det dannede ved at passere gennem cellemembranen nucleocapsid, overdækket superkapsidom, knop fra cellen, og den straks stoppe kort forlængelse af "plus" -kæden DNA. Derfor varierer længden af denne tråd. I en typisk akutte form for hepatitis B serologiske markører følgende rækkefølge vises i blodet: HBsAg, HBeAg og antistoffer (IgM, IgG): anti-HBcAg. Anti-HBeAg og anti-HBsAg.

Sammensætningen af hepatitis B virus har onkogen, men fandt, at, trænger ind i det cellulære kromosom (i dets forskellige sektioner), kan det virale DNA induceres i dem anderledes genetisk justering - deletion, translokation, amplifikation, som kan forårsage udviklingen af leverkræft - en af de alvorligste konsekvenser af viral hepatitis B.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8],

Modstand mod hepatitis B-viruset

Hepatitis B-viruset er stærkt resistent. Ved stuetemperatur forbliver det levedygtigt i 3 måneder, i frosset tilstand - i flere år. Viruset er fuldstændig inaktiveret ved autoklavering (120 ° C) ved tilbagesvaling i 30 minutter, med tør varme ved en temperatur på 180 "C i 60 min, ved 60 ° C -. For 10 timer resistente i surt medium, men er ødelagt i en alkalisk. Virussen dør, når den behandles med H202, chloramin, formalin, phenol og med UV-bestråling.

Patogenese og symptomer på hepatitis B

Virusen injiceres hæmatologisk direkte i leveren. I patogenese af hepatitis spiller autoimmune humorale og cellulære reaktioner en vigtig rolle. Det antages, at hepatocyt tab skyldes ikke så meget til den direkte virkning af virussen selv, men med værten immunologiske reaktioner, der opstår i forbindelse med ændringen af cellemembranen af virale proteiner, som inducerer fremkomsten af autoantistoffer til leverceller. Derfor kan udvikling af kronisk hepatitis og levercirrhose betragtes som en autoimmun sygdom.

Cellulære autoimmune reaktioner på virale proteiner indeholdt i hepatocytmembranen medieres af T-cytotoksiske lymfocytter og andre hepatiske dræberceller. Derfor kan akut dystrofi i leveren betragtes som en reaktion af afvisning af et ejendommeligt heterograft.

Inkubationsperioden varer fra 45 til 180 dage, i gennemsnit 60 til 90 dage. Det kliniske forløb af hepatitis B er kendetegnet ved stor mangfoldighed; sygdommen kan forekomme: i latent form, detekteres kun ved laboratoriemetoder, i en typisk isterisk form og i en ondartet form, der slutter dødelig. Varigheden af det forudgående stadium varierer fra en dag til flere uger. Icteric periode er sædvanligvis lang og er kendetegnet ved veldefinerede symptomer (gulsot, hyperbilirubinæmi, mørk urin, gulsot sclera). Langvarig formular observeres i 15-20% af patienterne og 90% af dem udvikler kronisk hepatitis B. Patienter med kronisk danner hyppigt observerede autoimmune processer er ledsaget af et højt indhold af protivopechenochnyh antistoffer, som detekteres ved enzymbundet immunosorbentassay (IPM). Hos børn er hepatitis B mild og ofte uden gulsot hos unge børn - for det meste asymptomatiske.

Postinfektiøs immunitet (humoral og cellulær) er lang, livslang på grund af virusneutraliserende antistoffer (anti-HBsAg) i fravær af et overfladeantigen i blodet. Ofte observeret latent immunisering på grund af gentagen kontakt med HBV, hvilket er årsagen til udbredt immunitet mod virus blandt befolkningen. Normalt gendannes patienter med akut hepatitis B helt, da antistofferne akkumuleres til det. Men i nogle tilfælde produceres der ikke antistoffer mod det på trods af det høje niveau af virusantigen i blodet (en omstændighed, der forklarer, hvorfor parenteral infektion forekommer oftest). Virussen forbliver i leveren, og en person i lang tid, nogle gange for livet, bliver en kronisk bærer. Denne omstændighed er tydeligvis forbundet med et svagt immunrespons. Et af de mest almindelige udfald af kronisk hepatitis B er cirrose og levercancer, som udvikler sig efter en latent periode på op til 30-50 år.

Epidemiologi af hepatitis B

Kilden til infektion med hepatitis B-virus er kun en person. I modsætning til tidligere repræsentationer at infektion med hepatitis B-virus udelukkende forekommer ved den parenterale vej, er nu bevist, at det findes i forskellige sekreter og ekskreter :. Spyt, nasopharyngeale sekreter, fæces, tårevæske, sæd, menstruationsblod, etc. Således, infektion forekommer ikke kun ved den parenterale vej, men også seksuel og vertikal (fra mor til foster), t. E. Næsten infektion med hepatitis B-virus kan på mange måder.

Hepatitis B i verden dræbte så mange mennesker som i alle årene af Anden Verdenskrig. Antallet af bærere af HBV ifølge WHO er fra 0,1 til 20% af befolkningen i forskellige lande eller regioner.

[9], [10], [11], [12], [13], [14], [15], [16],

Diagnose af hepatitis B

I øjeblikket er den vigtigste metode til diagnose af hepatitis B brugen af en revers passiv hæmagglutineringsreaktion (ROSGA) til at detektere en virus eller dens overfladeantigen, HBsAg. Som allerede nævnt indeholder blodet af overfladeantigenet mange gange mere end selve viruset (100-1000 gange). Til reaktionen af ROPGA er erythrocytter sensibiliseret med antistoffer mod hepatitis B-viruset. Hvis der er et antigen i blodet, opstår der en hæmagglutineringsreaktion. ROPGA er enkel, praktisk, meget specifik. Til påvisning af antistoffer mod HBsAg-virusantigenet anvendes forskellige immunologiske metoder (DSC, RPGA, IFM, RIM, etc.). Derudover anvendes PCR-varianter til at detektere HBV og dets antigener.

Forskellige immunologiske metoder kan anvendes til at detektere antistoffer mod det virale antigen (HBsAg) i patientens serum (DSC, RPGA, udfældningsreaktion, IFM, RIM osv.).

[17], [18], [19], [20], [21], [22],

Specifik forebyggelse af hepatitis B

Under hensyntagen til den høje forekomst af hepatitis B og også at der er mange HBV-bærere i verden, er WHO-vaccinationer mod hepatitis B obligatoriske og skal udføres i det første år af livet. Der foreslås to typer vacciner til vaccination. For at forberede en af dem anvendes plasma af virusbærere som et råmateriale, da virusantigenet i den er indeholdt i mængder, der er tilstrækkelige til fremstilling af vaccinen. Hovedbetingelsen for fremstilling af denne type vaccine er deres fuldstændige sikkerhed, dvs. Fuldstændig inaktivering af viruset, som tilvejebringes ved vaccineforberedelsesteknologi. Til fremstilling af en vaccine af en anden type anvendes genetiske metoder, især en rekombinant klon af gær, der producerer overfladeantigenet af hepatitis B-virus, anvendes til at fremstille det antigeniske materiale.

Begge vacciner er yderst effektive (beskytter 95% af vaccineret). Varigheden af postvaccinal immunitet er ikke mindre end 5-6 år. Vacciner er blevet skabt til både voksne og spædbørn og småbørn - den vigtigste komponent i den globale kamp mod hepatitis B. Det fulde kursus af vaccination består af tre injektioner:

Jeg doserer - umiddelbart efter fødslen II dosis - efter 1-2 måneder III dosis - indtil udgangen af det første år af livet.

Disse vacciner, der indgår i det udvidede program af immunisering, WHO og på linje med kalenderen for dens gennemførelse (i henhold til WHO anbefalinger på 1. Leveår er vaccineret mod tuberkulose, polio, hepatitis B, mæslinger, stivkrampe, difteri, kighoste).

Gammaglobulin, der indeholder antistoffer mod HBV, anvendes til akutpasiv immunoprofylakse til personer, der har haft kontakt med en hepatitis B patient.

Til behandling af hepatitis B (akutte og kroniske former) anvendes interferon og amixin (til induktion af dets endogene syntese). Ved behandling af kronisk hepatitis B er et nyt lægemiddel lamivudin (syntetisk nukleosid) effektivt.