Salmonella - patogener af tyfus og paratyphoid

Tyfusfeber er en alvorlig akut infektionssygdom præget af dyb generel forgiftning, bakteriæmi og specifik skade på tyndtarmens lymfearmatur. Intoxikation manifesteres af svær hovedpine, forvirring, delirium (tyfus fra græsk typhos - tåge). Tyfus som en selvstændig nosologiske enhed for første gang forsøgt at isolere russisk læge AG Pyatnitskii tilbage i 1804, men endelig gjorde i 1822 R. Breton, som differentierer denne sygdom fra tarm tuberkulose og foreslog smitsom karakter af tyfus.

Den forårsagende middel til tyfusfeber - Salmonella typhi - blev opdaget i 1880 af K. Ebert og isoleret i ren kultur i 1884 af K. Gaffki. Snart er blevet isoleret og undersøgt patogener af paratyfus A og B - S. Paratyphi A og S. Paratyphi B. Salmonella Slægten omfatter en stor gruppe af bakterier, men kun tre af dem - S. Typhi, S. Paratyphi A og S. Paratyphi B - forårsage sygdom hos en person med et klinisk billede af tyfusfeber. Morfologisk er de ikke skelnelige: korte gram-negative stænger med afrundede ender, 1-3,5 mikron lange, 0,5-0,8 mikron i diameter; sporer og kapsler dannes ikke, har aktiv mobilitet (peritrichi). Indholdet af G + C i DNA er 50-52 mol%.

Patogener tyfus og paratyfus - fakultative anaerober, den optimale temperatur for vækst 37 ° C (men kan vokse i området fra 10 til 41 ° C), pH 6,8-7,2; er ikke krævende for næringsmedier. Vækst på bouillon ledsages af turbiditet, på MPA, udbudsrunde er der dannet glatte, gennemskinnelige kolonier med en diameter på 2-4 mm. Imidlertid er S. Typhi kolonier med et Vi-antigen overskyet. Kolonier S. Paratyphi I mere grove, efter nogle få dage danner de langs deres periferi særlige ruller. På Endomo-miljøer er kolonierne af alle tre salmonellaer farveløse på bismuth-sulfitagar - sort. I tilfælde af dissociation på tætte medier vokser R-form kolonier. Det selektive miljø for de forårsagende midler af tyfusfeber og paratyphoid er galde eller gyllevæske.

[1], [2], [3], [4], [5], [6],

Biokemiske egenskaber for patogener af tyfus og paratyphoid

Patogener tyfus og paratyfus give en positiv reaktion med MR, ikke danner indol ikke flydende gelatine, reducerede nitrater til nitritter, ikke danner acetoin. S. Typhi vokser ikke på sulten agar med citrat. De vigtigste biokemiske forskelle mellem patogener tyfus og paratyfus konkluderede, at S. Typhi nogle fermenter glucose og andre carbohydrater kun til dannelse af syre, en S. Paratyphi A, og S. Paratyphi B - og til at danne syre og gas.

S. Typhi om evnen til at fermentere xylose og arabinose er opdelt i fire biokemiske typer: I, II, III, IV.

Xylose + - + -

Arabinose - - + +

[7], [8], [9], [10],

Antigenisk struktur af patogener af tyfus og paratyphoid

Salmonella har O og H antigener. På O-antigener er de opdelt i et stort antal serogrupper, og ifølge H-antigener - til serotyper (for yderligere oplysninger om den serologiske klassifikation af salmonella, se næste afsnit). S. Typhi, S. Paratyphi A og S. Paratyphi B adskiller sig fra hinanden både i form af O-antigener (tilhører forskellige serogrupper) og H-antigener.

I 1934 fastslog A. Felix og R. Pitt, at S. Typhi, ud over O- og H-antigenerne, har et andet overfladeantigen, som de kaldte virulensantigenet (Vi-antigenet). Ifølge den kemiske natur af Vi-antigenet er forskellig fra O og H-antigener består af tre forskellige fraktioner, men dens base er N-polymerkompleks atsetilgalaktozaminouronovaya syre med m. M. 10 MD. Vi-antigen findes sædvanligvis i frisk isolerede kulturer, men det går nemt tabt under indflydelse af forskellige faktorer (især når de dyrkes ved temperaturer over 40 ° C og under 20 ° C i medier med carbolsyre osv.) ved lang opbevaring af kulturer ødelægges ved temperatur 100 ° С i løbet af 10 minutter. Da den er placeret mere overfladisk end O-antigen, interfererer dets tilstedeværelse med agglutination af S. Typhi-kulturen med O-specifikt serum, derfor skal en sådan kultur kontrolleres i agglutineringsreaktionen med Vi-serum. Tværtimod fører tabet af Vi antigen til frigivelsen af O-antigen og genoprettelsen af O-agglutination, men Vi-agglutination går tabt. Det kvantitative indhold af Vi-antigen i S. Typhi kan variere meget, derfor foreslår F. Kauffmann at klassificere S. Typhi ifølge indholdet af Vi-antigen i tre grupper:

• rene v-former (tysk fjende - mange);
• rene w-former (tysk wenig - lille);
• mellemliggende vw-former.

Tre usædvanlige mutanter af S. Typhi blev fundet: Vi-I-R-form, cellerne mangler H- og O-antigener, men de fastholder vedvarende Vi-antigenet; O-901 - blottet for H- og Vi-antigener; H-901 - indeholder O- og H-antigener, men er uden Vi-antigen. Alle tre antigener: O-, H- og Vi- har udtalt immunogene egenskaber. Tilstedeværelsen af Vi-antigener tillader kulturen af S. Typhi at være fagtypet. Der er 2 typer fag, der kun lyser de kulturer, der indeholder Vi-antigenet: Vi-I er universalsagen, lyser de fleste af Vi-indeholdende S. Typhi kulturer; og et sæt Vi-II-fag selektivt selekterer S. Typhi-kulturen. Dette blev først vist i 1938 af J. Craig og K. Ian. Ved hjælp af Vi-fager af type II delte de S. Typhi i 11 fagtyper. I 1987 var 106 forskellige Vi-fagtyper af S. Typhi blevet identificeret. Deres følsomhed over for de tilsvarende fag er et stabilt tegn, derfor har fagotyping en vigtig epidemiologisk betydning.

Fagotypeprogrammerne for S. Paratyphi A og S. Paratyphi B er også blevet udviklet, ifølge hvilke de er opdelt i snesevis af fagotyper. Det er signifikant, at salmonellapagotyperne ikke kan afvige fra hinanden på nogen anden måde.

[11], [12], [13], [14],

Modstandsdygtighed over patogener af tyfus og paratyphoid

Kræftfremkaldende stoffer af tyfus og paratyphoid i det ydre miljø (vand, jord og støv) fortsætter, afhængigt af forholdene, fra flere dage til flere måneder. Det strømmende vand kan overleve op til 10 dage, kongestiv - op til 4 uger på grøntsager og frugt -. 5-10 dage på servicet - op til 2 uger, i smør, ost -. 3 måneder, på is - op til 3 måneder . Og mere; opvarmning ved en temperatur på 60 ° C dræber om 30 minutter og koger - øjeblikkeligt. Konventionelle kemiske desinfektionsmidler dræber dem om nogle få minutter. Ledningsvand indeholdende chlor i en dosis på 0,5-1,0 mg / l eller vand ozonering sikre pålidelig desinfektion af både Salmonella og andre patogene tarmbakterier.

Faktorer af patogenicitet af patogener af tyfus og paratyphoid

Det vigtigste biologiske træk ved årsagssygdomme til tyfusfeber og paratyphoid A og B er deres evne til at modstå fagocytose og multiplicere i cellerne i lymfoidsystemet. De danner ikke eksotoksiner. Hovedfaktoren for deres patogenicitet ud over Vi-antigenet er endotoxin, som er karakteriseret ved usædvanlig høj toksicitet. Sådanne patogenicitetsfaktorer som fibrinolysin, plasmocoagulase, hyaluronidase, lecithinase osv. Findes meget sjældent i patogener af tyfus og paratyphoide infektioner. Den højeste frekvens findes i DNA-ase (75-85% af de studerede S. Typhi og S. Paratyphi B kulturer). Det er blevet konstateret, at stammer af S. Typhi med et plasmid med 6 mM er mere virulente. Derfor er spørgsmålet om patogenitetsfaktorerne for disse salmonella fortsat at blive undersøgt.

[15], [16], [17],

Postinfektiøs immunitet

Holdbare, langvarige gentagne sygdomme af tyfus og paratyphoid er sjældne. Immunitet skyldes udseendet af antistoffer mod Vi-, O- og H-antigener, immunhukommelsesceller og øget aktivitet af fagocytter. Postvaccinal immunitet, i modsætning til postinfektion, er kortvarig (ca. 12 måneder).

Epidemiologi af tyfus og paratyphoid

Kilden til tyfusfeber og paratyphoid A er kun en person, en syg eller en transportør. Kilden til paratyphoid B kan ud over mennesker være dyr, herunder fugle. Infektionsmekanismen er fækal-oral. Den inficerende dosis af S. Typhi på 105 celler (forårsager en sygdom på 50% af frivillige), inficerer doser af salmonella af paratyphoid A og B er meget højere. Infektion forekommer hovedsageligt som følge af direkte eller indirekte kontakt samt gennem vand eller mad, især mælk. De største epidemier forårsagede infektion med patogener (vandepidemier).

[18], [19], [20], [21], [22],

Symptomer på tyfus og paratyphoid

Inkubationsperioden for tyfusfeber er 15 dage, men den kan variere fra 7 til 25 dage. Det afhænger af den inficerede dosis, patogenens virulens og patientens immunstatus. Patogenesen og det kliniske billede af tyfusfeber og paratyphoid A og B er meget ens. I udviklingen af sygdommen er de følgende faser tydeligt afsløret:

• invasion stadium. Den forårsagende middel trænger gennem munden ind i tyndtarmen;
• gennem lymfe måder Salmonella indtaste lymfoide formationer tyndtarmssubmucosaen (Peyerske plaques og ensomme hårsække) og reproducere dem, forårsage lymphangitis og lymfadenitis (originale abdominal-tyfus granulat);
• bakteriæmi - udgangen af patogenet i store mængder i blodet. Stoffet af bakteriæmi begynder ved slutningen af inkubationsperioden og kan (i fravær af effektiv behandling) fortsætte igennem hele sygdommen;
• forgiftningstrinnet opstår på grund af bakteriernes forfald under påvirkning af bakteriedræbende egenskaber af blodet og frigivelsen af endotoksiner;
• stadium af parenkymal diffusion. Fra blodet absorberes salmonella af knoglemarv, milt, lymfeknuder, lever og andre organer. Et stort antal tilgrundliggende agens for tyfus akkumuleres i galdegangene i leveren og galdeblæren, hvor den finder gunstige betingelser for deres reproduktion og hvor de baktericide egenskaber af blod svækket indflydelsen af galde;
• udskillelses-allergisk stadium. Da dannelsen af immunitet begynder frigivelsesprocessen fra patogenet. Denne proces udføres af alle kirtler: spyt, tarm, sved, mejeri (under fødslen af babyen), urinsystemet og især aktivt - leveren og galdeblæren. Salmonella udgivet fra galdeblæren kommer igen ind i tyndtarmen, hvorfra den del udskilles med afføring, og nogle invaderer igen ind i lymfeknuderne. Sekundær indføring i de allerede sensibiliserede knuder forårsager en hyperergisk reaktion i dem, hvilket manifesterer sig i form af nekrose og dannelsen af sår. Dette stadium er farligt ved muligheden for perforering af tarmvæggen (sår), intern blødning og udvikling af peritonitis;
• fase af genopretning. Den helbredende proces af sår forekommer uden udseende af desinficerende ar på jorden, ryddet af nekrotiske angreb.

Til gengæld er der i det kliniske billede af sygdommen forskel på følgende perioder:

• I første fase - stadion incrementi (1. Uge): en gradvis stigning i temperaturen til 40-42 ° C, en stigning i forgiftning og andre manifestationer af sygdommen.
• II - stadiet for maksimal udvikling af alle symptomer - stadion acme (2-3 ugers sygdom): temperaturen holdes på et højt niveau;
• III - sygdommens recessionste fase - den fjerde decmenti (4. Uge af sygdommen): et gradvist fald i temperatur og et fald i manifestationen af andre symptomer
• IV - fase af genopretning.

8-9 dages sygdom, og nogle gange senere, mange patienter synes roseolous udslæt på huden af underlivet, bryst og ryg. Udslæt (små røde pletter) er en konsekvens af de lokale produktive og inflammatoriske processer allergisk natur i overfladelagene af huden omkring lymfekarrene, der indeholder rigelige patogen. Klinisk genopretning falder ikke altid sammen med bakteriologiske. Ca. 5% af patienterne bliver kroniske bærere af salmonella typhus eller paratyphoid. Årsagerne til langsigtede (mere end 3 måneder og nogle gange mange år) transport af salmonella forbliver uklare. En kendt værdi i dannelse bærer ved lokal inflammation spiller i galden (undertiden urin) kanal, som ofte opstår i forbindelse med tyfus, paratyfus infektioner eller forværret som følge af disse infektioner. Imidlertid en lige så vigtig rolle i dannelsen af lange bærer Salmonella tyfus og paratyfus A og B spiller, L-transformation af dem. L-formet Salmonella mister H- og delvist 0-VI-antigener er normalt placeret, intracellulært (i knoglemarvsmakrofager), og er derfor ikke tilgængelig for enten kemoterapi eller for antistoffer, og kan forblive i kroppen længe været syg person. Vender tilbage til den oprindelige form og returnere dets antigene struktur salmonella igen blive virulent igen trænge ind i galdegangene, forværrer processen med bakterier, udskilles med fæces og så bæreren bliver en kilde til infektion for andre. Det er også muligt, at dannelsen af bakteriel transport afhænger af noget underskud i immunsystemet.

Laboratoriediagnose af tyfus og paratyphoid

Den tidligste og grundlæggende metode til diagnosticering af tyfus og paratyphoid er bakteriologisk - opnåelse af blodkultur eller myelokultur. Til dette formål undersøge blodet eller punktere knoglemarv. Blod såres bedst på medium Rapoport (galde bouillon med tilsætning af glucose, indikator og glasflaske) i et forhold på 1:10 (pr. 10 ml 1 ml blod). Såning bør inkuberes ved 37 ° C i mindst 8 dage og under hensyntagen til mulig forekomst af L-former - op til 3-4 uger. For anvendes identifikation af Salmonella isolerede kulturer (baseret på deres biokemiske egenskaber) diagnostiske adsorberet sera indeholder antistoffer mod antigener 02 (S. Paratyphi A), 04 (S. Paratyphi B) og 09 (S. Typhi). Hvis den isolerede kultur af S. Typhi ikke agglutineres med 09 serum, bør den kontrolleres med Vi-serum.

For at isolere S. Typhi er det muligt at anvende exudat, opnået ved at skarpe rosenol-voksende roseolocultures.

Bakteriologisk undersøgelse af afføring, urin og gal udføres for at bekræfte diagnosen, kontrollen af bakteriologisk genopretning ved udledning af konvalescerende og til diagnosticering af bakteriel transport. I dette tilfælde er materialet tidligere podet i berigelsesmedier (medier indeholdende kemikalier såsom selenit, som inhiberer væksten af E. Coli og andre repræsentanter for tarmfloraen, men ikke inhiberer væksten af Salmonella) og derefter med berigende medium - for differentiel diagnostisk medium ( Endo, vismutsulfitagar) for at isolere isolerede kolonier og opnå fra dem rene kulturer identificeret ved ovennævnte skema. For at detektere O- og Vi-antigen i serum og afføring fra patienter kan anvendes DGC TPHA med antistof diagnosticum, koagglyutinatsii reaktionsenheden-hæmagglutination, IFM. For den accelererede identifikation af S. Typhi er det lovende at anvende som probe en DNA-fragment, der bærer Vi-antigen-genet (identifikationstid 3-4 timer).

Siden slutningen af sygdommens første uge forekommer der antistoffer i patienternes serum, for at diagnosticere tyfusfeber i 1896 foreslog F. Vidal en reaktion af ekspanderet røragglutination. Dynamikken af antistoffer mod S. Typhi er unik: Antistoffer mod O-antigen forekommer først og fremmest, men deres titer falder hurtigt efter opsving; H-antistoffer fremkommer senere, men de fortsætter efter sygdom og vaccinationer i årevis. Med dette i tankerne, er reaktionen løber Vidal samtidigt adskille O- og N-diagnosticums (og også paratyfus A og B diagnosticums) for at undgå fejl som følge af immunisering tidligere er overført eller sygdom. Imidlertid specificitet Widals reaktionen ikke er høj nok, så den foretrukne anvendelse TPHA vendte, hvor diagnosticum sensibiliseret erythrocyt eller O- (O-detektionsantistof), eller Vi-antigen (til påvisning af Vi-antistoffer). Den mest pålidelige og specifikke er den sidste reaktion (Vi-hæmagglutination).

Diagnose af bakteriel bære af tyfus og paratyphoid

Det eneste bevis er isoleringen af bakterier fra dyrkningsmediet S. Typhi, S. Paratyphi A, S. Paratyphi C. Materialet til undersøgelsen er duodenale indhold, fæces og urin. Problemets kompleksitet ligger i, at bærere ikke altid udskiller med disse substrater, der er pauser og ganske lange. Som datterselskab metoder som tillader smal række individer adspurgte anvendelse serologiske tests (samtidig påvisning O-, H-, VI- eller O, Vi-antistoffer indikerer den mulige tilstedeværelse af patogenet i kroppen) og allergisk hud test med Vi-Tifina River. Sidstnævnte indeholder Vi-antigen, som ved interaktion med Vi-antistoffer giver en lokal allergisk reaktion i form af rødme og hævelse i 20-30 minutter. En positiv reaktion med Vi-typhin indikerer tilstedeværelsen af Vi-antistoffer i kroppen og den mulige tilstedeværelse af S. Typhi. For at identificere L-formerne af S. Typhi foreslås særlige immunofluorescerende antistoffer (til patogenernes L-form antigener). V.Murom tilbød en original metode til påvisning af bakterielle bærere. Det består i undersøgelsen af tamponer, der samtidig smides ind i kloaklukkerne over kloaknet af afviklingen.

[23], [24], [25], [26], [27], [28]

Behandling af tyfus og paratyphoid

Behandling af tyfusfeber er baseret på anvendelse af forskellige antibiotika, hvilke patogener har høj følsomhed (levomycetin, ampicillin, tetracycliner, etc.). Antibiotika reducerer sværhedsgraden af sygdomsforløbet og forkorter dets varighed. Overførslen af R-plasmider til salmonella fra E. Coli eller andre enterobakterier kan imidlertid føre til fremkomsten af farlige epidemiske kloner blandt dem.

Specifik profylakse af tyfus og paratyphoid

I stedet for syv forskellige tyfus vacciner, der tidligere har været anvendt, siden 1978 er der kun produceret en i vores land - en kemisk sorberet abdominal tyfus-monovalent. Men på grund af det faktum, at tyfus epidemi af sygdommen flyttede ind i kategorien af sporadisk (og dette er blevet gjort muligt primært takket være forbedret vand og sanitære systemer og forbedre sanitære kultur af befolkningen), behovet for masse immunisering mod ham forsvandt. Derfor udføres podning mod tyfusfeber kun i tilfælde af epidemiske indikationer.