Det forårsagende middel til tularæmi

Tularæmi er en primær sygdom hos dyr (gnavere), hos mennesker forekommer den som en akut infektionssygdom med et varieret klinisk billede og langsom bedring. Det forårsagende agens for tularæmi - Francisella tularensis - blev opdaget af G. McCoy og S. Chapin i 1912 under en epizooti blandt jordegern i området ved Tulare Lake (Californien), undersøgt i detaljer af E. Francis, til hvis ære slægten er opkaldt.

Disse er meget små, 0,2-0,7 µm i størrelse, kokcoide eller ellipsoide polymorfe stave, som meget ofte giver en bipolar farvning, når der anvendes specielle farvningsmetoder; de er ikke-bevægelige, gramnegative, danner ikke sporer; katalase-negative, danner H2S, strengt aerobe, den optimale temperatur for vækst er 37 °C, pH 6,7-7,2. Virulente stammer har en kapsel, danner syre uden gas under fermentering af nogle kulhydrater (glukose, maltose, mannose, fruktose, dextrin), fermenteringsgraden varierer mellem stammer, indholdet af G + C i DNA er 33-36 mol%. F. tularensis vokser ikke på almindelige medier. G. McCoy og Sh. Chapin brugte et koaguleret blommemedium. På det vokser tularæmi-bacillen i form af fine små kolonier, der ligner dugdråber, hvorefter kulturen får karakter af en delikat shagreen-belægning med en svagt udtrykt slimet konsistens. E. Francis foreslog næringsagar til dyrkning af tularæmi-bacillen, indeholdende 0,05-0,1% cystin, 1% glukose og 5-10% blod. På et sådant medium er væksten mere frodig og ru: kolonierne er runde med en glat overflade, mælkeagtige i farven, fugtige, med en slimet konsistens, omgivet af en karakteristisk grøn halo. Væksten er langsom, kolonierne når deres maksimale størrelse på den 3.-5. dag (1-4 mm). Tularæmi-bakterier formerer sig godt i blommesækken på et kyllingefoster og forårsager dets død på den 3.-4. dag.

Følgende aminosyrer er nødvendige for væksten af F. tularensis: arginin, leucin, isoleucin, lysin, methionin, prolin, threonin, histidin, valin, cystin, for nogle underarter - serin, tyrosin, asparaginsyre; derudover har de også brug for pantothensyre, thiamin og Mg2-ioner til vækst. Under hensyntagen til disse egenskaber kan syntetiske medier anvendes til dyrkning af F. tularensis.

Slægten Francisella tilhører klassen Gammaproteobacteria, rækken Proteobacteria. Denne slægt omfatter også F. novicida, hvis patogenicitet for mennesker ikke er blevet fastslået.

Det forårsagende agens for tularæmi er en intracellulær parasit. Dens virulens skyldes en kapsel, der hæmmer fagocytose; neuraminidase, som fremmer adhæsion; endotoksin; allergifremkaldende egenskaber i cellevæggen, samt evnen til at reproducere sig i fagocytter og undertrykke deres dræbervirkning. Virulensmekanismerne er endnu ikke blevet afkodet. Derudover er der fundet receptorer i tularæmibacillen, der er i stand til at interagere med Fc-fragmenter af IgG-immunoglobuliner. Som følge af en sådan binding forstyrres komplementsystemernes og makrofagernes aktivitet.

F. tularensis i S-formen (virulent) har to antigener - O og Vi (kapselantigen). O-antigenet er beslægtet med antigenerne fra Brucella. Dissociation S->SR->R fører til tab af kapsel, virulens og immunogenicitet. Arten F. tularensis er opdelt i tre geografiske racer (underarter):

• Holarktisk (lavpatogen for tamkaniner, fermenterer ikke glycerol og indeholder ikke enzymet citrullinureidase, som findes i lande på den nordlige halvkugle);
• Centralasiatisk (lavpatogen for kaniner, indeholder citrullinureidase og fermenterer glycerol);
• Nearctic (amerikansk), mere patogen for kaniner, fermenterer glycerol, indeholder citrullinureidase.

Derudover har stammer af den amerikanske og centralasiatiske underart fosfataseaktivitet, som er fraværende i stammer af den holarktiske underart.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ]

Resistens over for det forårsagende agens for tularæmi

F. tularensis er ret stabil i det ydre miljø, især hvis den findes i patologisk materiale. I foder, korn, der er forurenet med ekskrementer fra syge gnavere, overlever den op til 4 måneder; i vand - op til 3 måneder; i is - mere end 1 måned. Den er følsom over for direkte sollys (dør på 30 minutter), høj temperatur (ved 60 °C dør den på 10 minutter), og under påvirkning af 3% lysolopløsning, 50% alkohol, formalin og andre antiseptiske midler dør den på 5-10 minutter.

Epidemiologi af tularæmi

Den primære kilde til tularæmi i naturen er gnavere, hvoraf epizootier observeres under naturlige forhold. Mennesker bliver kun smittet fra dyr; patogenet overføres ikke fra person til person. Patogenet er fundet i 82 arter af gnavere og lagomorfer og findes oftest i repræsentanter for 4 familier: muselignende gnavere (Muridae), harer (Leporidae), egern (Sciuridae) og jerboer (Dipodidae). I Rusland er de primære bærere muselignende gnavere: vandrotter, almindelige markmus, husmus og bisamrotter.

Ifølge deres følsomhed over for tularæmi kan dyr opdeles i fire grupper:

• Gruppe 1 - de mest modtagelige (markmus, vandrotter, husmus, hvide mus, marsvin og nogle andre). Den mindste dødelige dosis er én mikrobiel celle;
• 2. gruppe - mindre følsomme (grå rotter, jordrotter osv.). Den minimale dødelige dosis er 1 milliard mikrobielle celler, men én mikrobiel celle er nok til at inficere nogle af dem;
• 3. gruppe (rovdyr - katte, ræve, fritter). Modstandsdygtig over for høje smitsomme doser, sygdommen forløber uden synlige manifestationer;
• Gruppe 4 - immun over for tularæmi (hovdyr, koldblodede dyr, fugle).

For mennesker er den minimale smitsomme dosis én mikrobiel celle. Mennesker kan blive smittet på alle mulige måder: direkte og indirekte kontakt med syge gnavere, deres lig eller genstande inficeret med gnavere; fordøjelsessystemet (ved at indtage mad og vand inficeret med gnavere), luftbårent støv og transmission. Infektion med tularæmibakterier er blevet fastslået hos 77 arter af blodsugende leddyr. Af særlig betydning er ixodide flåter, hvor patogenet fortsætter hele livet og endda overføres transovarialt til afkom. Disse omstændigheder bidrager til etablering af sygdommen i naturen. Mennesker bliver smittet med flåter ikke ved bid, men som følge af, at patogenet kommer på huden sammen med flåtens ekskrementer.

I Rusland er der 7 hovedlandskabstyper med naturlige fokus på tularæmi: mose, eng, steppe, skov, flodbred, tundra og tugai (ørken).

[ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ]

Symptomer på tularæmi

Det forårsagende agens for tularæmi trænger ind i kroppen gennem de ydre lag (beskadiget og intakt hud og slimhinder). Sår dannes ofte på penetrationsstedet. Gennem lymfekarrene kommer bakterierne ind i den regionale lymfeknude og formerer sig frit i den; den inflammatoriske proces fører til dannelsen af en bubo. Herfra trænger patogenet ind i blodet, bakteriæmi forårsager generalisering af processen, forskellige organer og væv er involveret i den, hvor spredning af bakterier fører til dannelsen af granulomer og nekrotiske sår. Allergisk omstrukturering af kroppen er forbundet med bakteriæmi og generalisering. Inkubationsperioden for tularæmi varierer fra 2 til 8 dage. Sygdommen begynder akut: feber, hovedpine, muskelsmerter, ansigtshyperæmi opstår. Det videre forløb afhænger af indgangsstedet, hvorefter følgende kliniske former for tularæmi skelnes: ulcerøs-glandulær (bubonisk), okulær-glandulær, anginal-glandulær, abdominal og pulmonal. Dødeligheden i tularæmi overstiger ikke 1-2%.

Postinfektiøs immunitet er stærk, vedvarende, i de fleste tilfælde livslang, har en cellulær natur, er hovedsageligt forårsaget af T-lymfocytter og makrofager, i mindre grad - antistoffer. Fagocytose hos individer med immunitet er fuldstændig.

Laboratoriediagnostik af tularæmi

Alle mikrobiologiske metoder anvendes til at diagnosticere tularæmi. Undersøgelsen udføres i sikre laboratorier. Materialet til undersøgelsen - blod, bubopunktur, sårskrabning, konjunktivaludflåd, faryngeal plak, sputum osv. - bestemmes af sygdommens kliniske form. Derudover kan vand og fødevarer medtages til undersøgelsen. I naturlige foci af tularæmi udføres planlagte systematiske undersøgelser for at isolere det forårsagende agens til tularæmi fra gnavere.

Den bakteriologiske metode til diagnosticering af tularæmi hos mennesker giver sjældent positive resultater. En renkultur isoleres normalt efter akkumulering på modtagelige forsøgsdyr. Hvide mus og marsvin anvendes til bioassays. Mus inficeres subkutant, marsvin - intraperitonealt; dyrene dør på 3.-6. dag, nogle gange efter rimfrost. Inficerede dyr holdes under særlige forhold (som ved diagnosticering af pest) og observeres i 6-14 dage. Gelforsøgsdyr dør ikke i 7-15 dage, de slagtes på 15.-20. dag, og ligene obduceres. I nærvær af tularæmi detekteres patologiske og anatomiske ændringer i form af en produktiv proces med nekrose. En renkultur isoleres fra indre organer på et blommemedium, glukose-cystein blodfokus osv. Identifikation er baseret på patogenets morfologi og tinktorielle egenskaber, fravær af vækst på MPA og agglutination med homologt serum. Patogenicitet for hvide mus og marsvin. En renkultur kan isoleres ved at inficere 12-dages kyllingefostre og blommesækken. For at isolere en renkultur af patogenet fra vand centrifugeres eller filtreres den gennem bakteriefiltre, og sedimentet bruges til at inficere forsøgsdyr. Når man studerer fødevarer, vaskes de med MP B, centrifugeres, og sedimentet bruges til at inficere forsøgsdyr.

Samtidig med den bakteriologiske undersøgelse fremstilles der udstrygningsprøver fra det undersøgte materiale, som farves i henhold til Romanovsky-Giemsa-metoden. I udstrygningsprøver fra organer kan der detekteres små kokoide og stavformede bakterier, som er placeret intracellulært og i form af klynger, der danner en delikat kapsel.

Til diagnostik anvendes en detaljeret agglutinationsreaktion, RPGA og RIF.

Allergiske tests anvendes til tidlig diagnosticering af tularæmi (fra den 5. dag efter sygdommens debut). Der anvendes to typer tularin, og derfor anvendes der to metoder til deres administration: kutan og intradermal. Da koncentrationen af allergenet i begge typer tularin er forskellig, er det uacceptabelt at anvende kutan tularin til en intradermal test og omvendt. Resultaterne af den allergiske reaktion tages dynamisk i betragtning efter 24, 36, 48 timer. Et infiltrat med en diameter på mindst 5 mm betragtes som et positivt resultat. Hos vaccinerede personer eller dem, der har haft tularæmi, forbliver allergiske tests positive i en årrække (anamnesisk reaktion).

Specifik forebyggelse af tularæmi

Til specifik forebyggelse anvendes en vaccine mod tularæmi, der blev fremstillet i 1930 af de russiske militærlæger B. Ya. Elbert og N.A. Gaisky fra Me 15-stammen. Vaccinen giver stærk immunitet i 5-6 år ved infektion med den europæiske og holarktiske underart og er effektiv mod den amerikanske variant af patogenet. Vaccination udføres i henhold til epidemiologiske indikationer, såvel som for personer, der tilhører risikogrupper. Samtidig vaccination mod tularæmi og brucellose; tularæmi og pest, samt mod tularæmi og nogle andre infektioner er tilladt.

Uspecifik forebyggelse af tularæmi er den samme som for andre zoonoser og sigter primært mod at bekæmpe gnavere.